2024年高考生物一轮复习（新人教版） 第10单元　第6课时　基因工程的基本工具和基本操作程序.pptxVIP

基因工程的基本工具和基本操作程序;;;PARTONE;别名;2.基因工程的诞生和发展

(1)肺炎链球菌转化实验不仅证明DNA是遗传物质，还证明了DNA可在同种生物不同个体之间。

(2)DNA双螺旋结构的提出和的证明。

(3)中心法则的确立。

(4)的破译。

(5)基因转移载体和的发现为DNA的切割、连接以及功能基因的获得创造了条件。;(6)体外重组的实现。

(7)重组DNA表达实验的成功。

(8)DNA测序和合成技术的发明。

(9)技术的发明。

(10)技术可以实现对特定基因的定点插入、敲除或替换。;3.重组DNA技术的基本工具

(1)限制性内切核酸酶(也称“限制酶”);(2)DNA连接酶;(3)载体;(1)源于选择性必修3P71“旁栏思考”：①原核生物中存在限制酶的意义是什么？

提示原核生物中限制酶的作用是切割外源DNA以保证自身安全，防止外来病原物的危害。

②限制酶来源于原核生物，为什么不能切割自己的DNA分子？

提示原核生物DNA分子中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。;(2)源于选择性必修3P72“旁栏思考”：DNA连接酶和DNA聚合酶(填“是”或“不是”)一回事。原因是①DNA连接酶连接的是，而DNA聚合酶是把单个的连接到已有的DNA片段上。②起作用时需要以一条DNA链为模板，而不需要模板。;延伸

应用;延伸

应用;;(1)请用图示法写出限制性内切核酸酶Ⅰ和限制性内切核酸酶Ⅱ切割后形成黏性末端的过程。;提示限制性内切核酸酶Ⅰ：;(2)切割图示中的目的基因和质粒应选用哪类限制酶？请说明理由。;1.下表为常用的限制性内切核酸酶(限制酶)及其识别序列和切割位点，由此推断，下列说法错误的是;A.HindⅡ、SmaⅠ两种限制酶切割后形成平末端

B.Sau3AⅠ限制酶的切割位点在识别序列的外部

C.BamHⅠ和Sau3AⅠ两种限制酶切割后形成相同的黏性末端

D.一种限制酶一定只能识别一种核苷酸序列;HindⅡ、SmaⅠ两种限制酶沿着中轴线切口切开，切割后形成平末端，A正确；

Sau3AⅠ限制酶识别GATC序列，切割位点在识别序列的外部，B正确；

BamHⅠ限制酶识别GGATCC序列，Sau3AⅠ限制酶识别GATC序列，切割后形成相同的黏性末端GATC，C正确；

HindⅡ能识别GTCAAC，也能识别GTTAAC，D错误。;2.质粒是基因工程中最常用的目的基因运载工具。下列有关叙述正确的是

A.质粒是只存在于细菌细胞质中能自主复制的小型环状双链DNA分子

B.在所有的质粒上都能找到一个或多个限制酶切割位点

C.携带目的基因的重组质粒只有整合到宿主细胞的染色体DNA上才会随

后者的复制而复制

D.质粒上的抗性基因常作为标记基因供重组DNA的鉴定和选择;质粒不只分布于原核生物中，在真核生物——酵母菌细胞内也有分布；并不是所有的质粒上都有限制酶的切割位点，从而成为合适的运载目的基因的工具；重组质粒进入受体细胞后，可以在细胞内自我复制，也可以整合后复制。;与DNA有关的几种酶的比较;PARTONE;1.目的基因的筛选与获取

(1)目的基因：在基因工程的设计和操作中，用于改变受体细胞或获得预期等的基因。

(2)筛选合适的目的基因

①从相关的已知的基因中进行筛选是较为有效的方法之一。

②利用和序列比对工具进行筛选。;(3)目的基因的获取

①人工合成目的基因。

②PCR和扩增目的基因

a.PCR(聚合酶链式反应)：是一项根据的原理，在体外提供参与DNA复制的各种与反应条件，对目的基因的核苷酸序列进行的技术。

b.PCR反应的条件：一定的、DNA模板、2种、4种______

、DNA聚合酶，以及