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医学研究杂志2014年2月第43卷第2期·论善·
骨髓增生异常综合征(MDS)基因诊断研究
冯宝章郝建萍雷健玲邵宗鸿
摘要目的根据Southern印迹杂交结果设计并合成适当引物。方法以32例MDS、13例可疑MDS、53例其他血液病
和8例正常人骨髓细胞DNA为模板进行PCR。根据PCR结果和用于上述Southern印迹杂交的限制性酶切位点，设计并合成2
个寡核苷酸(Oligos)经地高辛标记，对33例MDS(包括转白血病者)，3例可疑MDS和19例其他血液病患者骨髓细胞涂片作原
位杂交(ISH)。结果MDS有共同的PCR产物电池带型。MDS原位杂交均呈阳性反应。对照组19例中仅有1例AA阳性反
应，可疑MDS3例中有2例阳性反应，且杂交信号的增强与MDS转白血病相关(P0．01)，也与SCD阴性相关(P0．01)。结论
建立起MDSPCR基因诊断法，笔者设计的两条Oligos所包含的限制性酶切位点的确是MDSC—erbB重排位置和重排／扩增位
置，为MDS基因治疗提供了靶基因的靶位置。
关键词MDSV—erbBPCROligos原位杂交基因诊断
[中图分类号]R446[文献标识码]A
GeneDiagnosisforMyelodysplasticSyndromes(MDS)．Baozhang，Haojianping，LeiJianling，ShaoZonghong．J，—erb
Lab．，V—erb(Tian)GeneTherapyCo．LTD，n口nfin300020，China
Abstract0bjectiveBasedonSouthernblotresults，wedesignedandsynthesizedapairofprimerandtwo0ligodeoxynucleotides
(OLigos)forMDSgenediagnosis．MethodsThePCRtestonbonemarrowcellSDNAfor32casespatientswithMDS，13caseswith
suspiciousMDS，53caseswithotherhematologicdiseasesand8normaldonners．TwoOligosweredesignedandsynthesizedandthen
markedwithdigoxin．In—situhybridization(ISH)，bonemarrowcellsmearwasperformedfor33casespatientswithMDS(including
MDStransformated—leukemia)，3casessuspiciousMDSand19casesotherhematologicdiseases．ResultsTheresultsshowedthatall
MDScaseshaveaeommonPCRelectrophoreticbandtype．AllMDSyieldedpositivereactioninISH．Incontrollgroupof19cases，how—
ever，therewasonly1caseAA，2outof3casessuspiciousMDSshowedpositivereaction．ThesignalenhancementofISHisrelatednot
onlytoMDStransformationintoleukemia(P0．O1)，butalsotoSCDnegativereacation(P0．01)．ConclusionThisproducesa
MDSPCRgenediagnosismethod．ThisprovesthattherestrictionsitewithintwoOligoswedesignedisindeedatthepositionofMDSC—-
erbBrearrangementandrearrangement／amplification．Hence．atargetpositionforMDSgenetherapyisf0und．
KeywordsMDS；V—erbB；PCR；Oligo
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