高表达hRAMP1基因腺病毒载体的构建及其在兔MSCs中表达的实验研究.pdfVIP

高表达hRAMP1基因腺病毒载体的构建及其在兔

MSCs中表达的实验研究

近年来，随着干细胞技术的不断发展和应用，基因转染技术已成为

干细胞治疗的重要手段之一。基因转染技术是将外源基因（例如表达载

体）引入目标细胞或组织，从而修改其基因表达的工具。在这种技术中，

腺病毒载体作为一种目前广泛采用的基因传递向量，已被广泛应用于基

因转染研究和临床应用。

在本研究中，我们构建了一个高表达hRAMP1基因的腺病毒载体，

并将其用于兔髓间充质干细胞（MSCs）的转染，以研究其对MSCs的影

响。hRAMP1是一种和转化生长因子β（TGF-β）相关的膜蛋白，能够改

变TGF-β信号通路的活性。hRAMP1在MSCs中的高表达能够改善其抗炎

和再生能力，因此在干细胞治疗中应用广泛。

我们首先构建了一个包含hRAMP1基因和荧光蛋白（EGFP）标记的

表达载体。该载体使用CMV启动子驱动hRAMP1和EGFP的并行表达。

随后，我们将该载体转染到HEK293T细胞中，以制备腺病毒载体。通过

酶切和PCR检测，我们确认了该载体已成功插入hRAMP1基因。电镜检

测结果表明，腺病毒载体粒子的直径为60-80nm，与已知的腺病毒粒子

直径