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学习要点010203《微生物的实验室培养》预习课件基础知识实验操作结果分析与评价基础知识(1)按物理状态来分:培养基可分为固体培养基和液体培养基。固体培养基用于菌种分离、鉴定菌落等。(2)按功能来分,可分为选择培养基和鉴别培养基。(3)按成分来分,可分为天然培养基和合成培养基。1.培养基的类型和用途2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方3.不管哪种培养基,一般都含有水、碳源、和氮源、无机盐等营养物质,另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。4.培养基的用途液体培养基:增菌、工业生产固体培养基:纯化(分离),
鉴定、活菌计数、
保藏菌种半固体培养基:动力检测无菌技术的概念无菌操作泛指在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。无论是随后将要学到的倒平板、平板划线操作,还是平板稀释涂布法,其操作中的每一步都需要做到“无菌”,即防止杂菌污染。只有熟练、规范地进行无菌操作,才可能成功地培养微生物。实验操作1.计算、称量2.溶化3.调pH4.过滤5.分装:分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上,以免沾污棉塞而引起污染。分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。6.加塞7.包扎8.灭菌:将50ml培养基用玻棒转移至三角锥瓶中,塞上棉花塞,包上牛皮纸,再放入高压蒸气灭菌锅,在压力为100kPa、温度为121℃,灭菌15~30min。将培养皿用旧报纸包裹,放入干热灭菌箱内,在160~170℃下灭菌2h。9.倒平板:待培养基冷却到50℃左右时,在酒精灯附近倒平板。2d后观察平板,无杂菌污染才可用来接种。10.无菌检查:将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24—48小时,以检查灭菌是否彻底。1.培养基灭菌后,需要冷却到50℃左右时,才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度?2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰?3.平板冷凝后,为什么要将平板倒置?4.在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能用来培养微生物吗?为什么?预习思考1.平板划线法:第一区域第二区域第三区域第四区域第五区域1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗?为什么?2.在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线?3.在作第二次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开始划线?预习思考6支试管,分别加入9ml无菌水1ml1011ml1021ml1031ml1041ml1051ml1062.稀释涂布平板法:a.梯度稀释菌液:菌液b.涂布平板:滴灼试涂涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求,想一想,第2步应如何进行无菌操作?预习思考结果分析与评价(一)培养基的制作是否合格(二)接种操作是否符合无菌要求(三)是否进行了及时细致的观察与记录退出*学习要点010203*
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