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变异链球菌重组质粒pEGFP-N1-SrV+的构建及真核
表达的开题报告
一、研究背景
致病菌常常依靠其表面蛋白质与宿主细胞发生互作来进行感染。链
球菌是一种常见的致病菌，其中包括很多会引起各种疾病的类型。研究
表明，链球菌的表面蛋白质能够结合宿主细胞并诱导免疫反应，因此这
种蛋白质成为研究链球菌病理学和免疫学的热点。在此基础上，通过建
立重组表面蛋白质，可以快速地进行抗原特异性抗体筛选，为研究链球
菌的诊断和治疗提供有力的支持。
二、研究目的
基于重组表面蛋白质筛选，本研究旨在构建变异链球菌重组质粒
pEGFP-N1-SrV+，并在真核细胞表达。
三、研究内容
1.回收变异链球菌的基因组DNA，扩增SrV+基因并纯化产物。
2.构建带有SrV+基因的重组质粒pEGFP-N1-SrV+，并纯化得到正
常重组质粒。
3.转染重组质粒至尺泽细胞，利用荧光显微镜观察质粒转染后细胞
荧光表达情况及其稳定性。
4.使用Westernblot及ELISA等实验方法验证质粒表达的SrV+表
面蛋白质。
四、研究意义
通过构建重组质粒并在真核细胞表达，本研究为研究SrV+表面蛋白
质的抗原特异性抗体筛选提供了基础，为进一步研究链球菌的诊断和治
疗提供了新的思路和方法。同时，研究中建立的相关实验技术也具有一
定的参考和借鉴价值。
五、研究进展
已经成功地扩增了SrV+基因并纯化产物，正在进pEGFP-N1-SrV+
质粒的构建，并计划进行质粒转染至尺泽细胞的实验。下一步将进一步
研究真核细胞表达SrV+表面蛋白质的表达情况及其在免疫学研究中的应
用。
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