《课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》优质课教案设计.docVIP

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

设计思路：本节课为一轮复习课，通过问题导学指导学生回归教材，再通过知识梳理巩固基础。命题探究熟悉高考题型，提高解题能力。

一、问题导学：

（一）筛选菌株

1、怎样寻找目的菌株？

2、实验室中微生物筛选原理是什么？

（二）微生物的计数

1、微生物计数方法有哪些？

2、稀释涂布平板法统计结果与实际相比误差怎样？原因是？

3、稀释涂布平板法每个稀释度至少需涂布几个平板？目的是什么？每克样品菌株数计算公式？

4、土壤中微生物样品稀释倍数分别是多少？为什么要这样稀释？目的是什么？

5、如何设置对照？设置对照的目的是什么？

6、不同微生物培养条件分别是什么？

7、怎样计数？目的是？

8、菌落特征包括哪些方面？

（三）土壤中分解尿素的细菌的选择与分离培养

1、土壤中的细菌能分解尿素的原因是？方程式？

2、分离培养的实验流程？

该过程操作有哪些注意事项？

3、如何判断培养物中是否有杂菌污染？

4、如何判断选择培养基有选择作用？

5、如何鉴定分离到的细菌能够分解尿素？

二、知识梳理:

1.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

(1)分离原理：土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶，这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起到催化作用。

(2)统计菌落数目一般用稀释涂布平板法。

①统计菌落数目时，培养基表面生长的1个菌落，来源于样品稀释液中1个活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300_的平板进行计数。

②从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数的计算方法是(平均菌落数÷涂布的稀释液体积)×稀释倍数_。

③利用稀释涂布平板法成功统计菌落数目的关键是恰当的稀释度_。

特别提醒用稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，这是因为当两个或多个细胞在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。

(3)实验流程：土壤取样→样品的稀释→微生物的培养与观察→细菌的计数。

知识拓展用显微镜直接计数法计数：血细胞计数板法

①结构：常用的是1mm×1mm×0.1mm方格的计数板(如图)。每个计数板上有两个计数室，每个计数室上刻有9个大方格，其中只有中间的大方格为计数室，大方格的长和宽各为1mm，深度为0.1mm，其容积为0.1mm3；大方格内分为25中格，每格又分为16小格，即大方格是由400个小方格组成。

②操作：将清洁干燥的血球计数板的计数室上加盖专用的盖玻片，用吸管吸取稀释后的菌液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行缓缓渗入，充满计数室。

③计数：在显微镜下计数4～5个中方格内的菌体数，求出每个小方格所含有的细菌的平均数，按照以下公式计算：每毫升原液含有的菌数＝每小格平均细菌数×400×104×原液被稀释倍数。

三、探究命题方向：

命题点一选择培养基成分及配制方法的分析

1．选择培养基是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基。利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来。为选择酵母菌和硝化细菌，应选用的培养基分别为()

A．伊红美蓝培养基、含青霉素的培养基

B．含青霉素的培养基、含氨的无机培养基

C．含氨的无机培养基、含青霉素的培养基

D．含青霉素的培养基、伊红美蓝培养基

答案B

解析酵母菌是真菌，通常可以用含青霉素的培养基进行选择培养，因为青霉素抑制细菌生长，但不能抑制真菌生长。硝化细菌为自养型生物，能够利用氨转变为亚硝酸和硝酸所释放的能量，把无机物转变为有机物以维持自身生命活动，利用含氨的无机培养基可进行选择培养。

2．苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如图所示，①为土壤样品。请据图回答下列问题：

(1)②中培养目的菌株的选择培养基中应加入________作为碳源，②中不同浓度碳源的培养基________(填“影响”或“不影响”)细菌的数量，如果要测定②中活细菌数量，常采用____________________法。

(2)④为对照，微生物在④中不生长，在⑤中生长，④与⑤培养基的主要区别在于________________________________________________________________________

________________________________________________________________________；

使用______________________________法可以在⑥上获得单菌落。采用固体平板培养细菌时进行倒置培养的原因是_______________________________