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第一节探索遗传物质的过程
第2课时
【高效导航】
1.学习目标:
(1)初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法。
(2)观察提取出来的DNA物质。
(3)理解DNA的理化特性及根据其理化特性而提取和鉴定的原理。
(4)利用DNA的性质进行实验分析和实验设计。
2.学习重点:
(1)DNA的提取的原理。
(2)DNA的提取的实验过程。
(3)DNA的鉴定技术。
3.学习难点:
DNA的粗提取的原理和过程。
“看”——知识经纬
探索遗传物质的过程(2)
探索遗传物质的过程
探索遗传物质的过程
DNA是主要的遗传物质
提取DNA
边做边学:DNA的粗提取
继续探究:DNA的鉴定
原理
材料
试剂
步骤
原理
材料
试剂
步骤
“导”—自主预习
二、提取DNA
(一)实验原理
1.DNA在NaCl溶液中的溶解度是随NaCl的浓度变化而改变的。DNA在___mol/L的NaCl溶液中的溶解度,据此可使溶解于NaCl溶液中的。
2.DNA不溶于酒精溶液,但细胞中某些物质可以溶于溶液,据此可提取杂质较少的DNA。
3.DNA+二苯胺色(用于DNA的鉴定)
(二)实验步骤
1.材料制备
2.方法步骤
(2)溶解核内DNA:滤液+2mol/LNaCl溶液40mL,玻璃棒沿个方向搅拌
(3)析出含DNA的粘稠物:向上述溶液中加入蒸馏水,并轻轻地沿_____个方向搅拌,出现丝状物,当丝状物不再增加时,停止加水(此时NaCl溶液相当于稀释到0.14mol/L)
(4)滤取含DNA的粘稠物:用层纱布过滤,含DNA的粘稠物留在纱布上
(5)DNA粘稠物再溶解:20mL2mol/LNaCl溶液50mL烧杯,
上述粘稠物缓慢搅拌min
(6)过滤含DNA的2mol/LNaCl溶液:用层纱布过滤,滤液中含DNA
(7)提取含杂质较少的DNA:上述溶液+95%酒精,搅拌,出现乳白色物,用玻璃棒将丝装物卷起。
(8)DNA鉴定:
“学”—互动探究
探究一DNA的粗提取
阅读课本P56-P57边做边学相关内容,并结合图4-4和图4-5,思考并小组讨论下列问题:
1.鸡血能用猪血代替吗?为什么?
提示:不能,因为哺乳动物的红细胞中没有细胞核,不能提取DNA。
2.鸡血中为何要加柠檬酸钠?为何要弃去鸡血细胞的上清液?
提示:防止血液凝固;因为上清液是血浆,不含细胞和DNA。
3.结合教材图4-4和图4-5回答,DNA在NaCL溶液中的溶解度是如何变化的?如何利用这一特点控制DNA在盐溶液中的溶解或者析出?
提示:DNA在0.14mol/L的NaCL溶液中的溶解度最小;高于或者低于0.14mol/L时,DNA的溶解度又逐渐加大。
4.DNA对其它物质的溶解性和耐受性有什么特点?这些特点对DNA的提取和鉴定有何作用?
提示:DNA不溶于酒精溶液,某些蛋白能溶于其中,可以将DNA与蛋白质进一步分离。蛋白酶能水解蛋白质,但对DNA没影响,大多数蛋白质不能忍受60--80℃的高温,而DNA在80℃以上才变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜,但对DNA没有影响。
5.前后三次过滤时,所用纱布的层数分别是多少?为什么?
提示:第一次用一层纱布,有利于核物质透过纱布进入滤液;第二次用多层纱布,能防止DNA丝状物透过纱布进入滤液;第三次用两层纱布,既有利于DNA透过纱布,又能防止其它杂质透过纱布。
6.若实验中所得黏稠物太少,其原因是什么?
提示:第一次加蒸馏水过少,细胞未充分胀破;第二次加蒸馏水过多或过少;第一次过滤用了多层纱布;第二次过滤用了一层纱布;使用了玻璃烧杯。
7.为什么反复地溶解与析出DNA,能够去除杂质?
提示:用高盐浓度的溶液溶解DNA,能除去在高盐中不能溶解的杂质;用低盐浓度使DNA析出,能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此,通过反复溶解与析出DNA,就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质。
8.用玻璃棒搅拌有什么意义?
提示:用玻璃棒搅拌可以加速血细胞和细胞核的破裂。注意应沿一个方向快速搅拌,但也不能太快太猛,防止打碎DNA。
9.两次析出DNA的方法分别是什么?原理分别是什么?
提示:第一次是加蒸馏水,降低氯化钠的浓度,促使DNA析出;第二次是加入冷酒精,因为DNA不溶于酒精溶液。
10.三次溶解DNA的液体分别是什么?原理分别是什么?
提示:第一次、第二次都是用浓度为2mol/L的氯化钠溶液,第三次用的是0。015mol/L的氯化钠溶液。其原理是DN
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