T_HBIQA 0005-2024 人体血液中5种雷帕霉素靶蛋白类抑制剂药物含量的测定 高效液相色谱-串联质谱法.docxVIP

ICS01.040.11CCSC10/29

T/HBIQA

河北省检验检疫学会团体标准T/HBIQA0005—2024

人体血液中5种雷帕霉素靶蛋白类抑制剂

药物含量的测定

高效液相色谱-串联质谱法

DeterminationoffiverapamycintargetproteininhibitorsinhumanbloodbyHPLC-MS/MS

2024-08-15发布2024-10-15实施

河北省检验检疫学会发布

T/HBIQA0005—2024

前言

本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由河北省检验检疫学会提出并归口。

本文件起草单位：河北省药品医疗器械检验研究院、河北科技大学。本文件主要起草人：李挥、李怡霖、梁艳、宋莉、王婷。

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T/HBIQA0005—2024

人体血液中5种雷帕霉素靶蛋白类抑制剂药物含量的测定高效液相色谱-串联质谱法

1范围

本文件规定了人体血液中5种雷帕霉素靶蛋白类抑制剂药物含量的高效液相色谱-串联质谱检测方

法。

本文件适用于人体血液中维妥色替，AZD8055，GDC-0941，依维莫司，替西罗莫司含量的测定。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4原理

样品用乙腈提取、无水硫酸镁盐析、十八烷基键合硅胶（C18）净化后，涡旋混匀、冷冻离心、氮吹复溶，进行液相色谱-质谱/质谱法测定，内标法定量。

5试剂和材料

5.1试剂和材料

除另有规定外，试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

5.1.1甲醇：色谱纯。

5.1.2乙腈：色谱纯。

5.1.3甲酸：色谱纯。

5.1.4无水硫酸镁。

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5.1.5N-丙基乙二胺（PSA）。

5.1.6标准品：维妥色替（CAS号：1009298-59-2），AZD8055（CAS号：1009298-09-2），GDC-0941

（CAS号：957054-30-7），依维莫司（CAS号：159351-69-6），替西罗莫司（CAS号：162635-04-3），他克莫司（CAS号：104987-11-3）纯度均≥98%。

5.1.7混合标准储备溶液的配制：分别称取维妥色替，AZD8055，GDC-0941，依维莫司，替西罗莫司

1mg（精确到0.01mg)，置10mL量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，分别配制成维妥色替，AZD8055，GDC-0941，依维莫司，替西罗莫司的储备溶液，于-20℃保存至分析。

5.1.8标准中间溶液的配制：取500μL标准储备溶液（5.1.7）至50mL量瓶中，加甲醇稀释，混匀，

得到1μg/mL的标准中间溶液于-20℃保存备用。

5.1.9内标储备液的配制：称取1mg（精确到0.01mg)他克莫司，置10mL量瓶中，用甲醇溶解并

定容至刻度，得到0.1mg/mL的内标储备液，于-20℃保存至分析。

5.1.100.1%（体积分数）甲酸水溶液：准确移取甲酸1.0mL置于1L量瓶中，用水定容，混匀。

6仪器设备

6.1液相色谱-串联质谱仪：配备电喷雾离子源（ESI）。

6.2氮吹浓缩仪。

6.3涡旋震荡仪。

6.4电子分析天平（精度0.01mg)。

6.5高速冷冻离心机（最高转速22000rpm）。

7试样制备

全部血液样本充分混匀后，在4℃、3000r/min条件下离心10min，取管内上清液分装，-80℃储存待测。

8试验步骤

8.1试样预处理

取200μL血液试样（7）于5mL离心管中，准确加入2mL乙腈、400mg无水MgSO4和30mg