肿瘤部位光敏剂浓度检测.ppt

线性关系理论模型一（这里给出理想检测时吸收激励光与激发荧光之间的关系，未考虑肿瘤细胞对激励光的散射、吸收、收集效率及肿瘤形状等因素）（1）（2）第20页,共45页，星期六，2024年，5月线性关系物理模型二：单一波长激励下光敏剂荧光相对与自体荧光的相对强度与光敏剂浓度线性关系。在波长激发下的公式关系（4）（5）（6-1）（6-2）第21页,共45页，星期六，2024年，5月考虑实际测量光谱值并非理论真实值，则定义如下关系式：（7）则（7）式可改写为：（8）上式中，N/R被认为待测荧光组织及返回激发光产生的背景噪声。物理模型三：双波长激励下可消去噪声对线性关系的影响。同理另一个波长激励下（9）第22页,共45页，星期六，2024年，5月(8)式与(9)式相减：（10）令则有（11）当待测肿瘤细胞浓度确定时，为常量。第23页,共45页，星期六，2024年，5月光谱分析实验研究实验方案： 采用荧光质量分析仪对正常细胞、PSD007孵化肿瘤细胞、正常细胞荧光光谱进行检测。正常细胞：大鼠的脾脏白细胞；肿瘤细胞:LG12实验内容： 确定细胞自体荧光、PSD007光敏剂荧光、ALA光敏剂荧光特征峰的位置，对激发光源波长进行指导。第24页,共45页，星期六，2024年，5月PSD007吸收光谱测量结果No. 波长(nm)吸收值 1 619.50 0.275 2 568.00 0.560 3 540.00 0.629 4 505.50 0.852 5 405.00 3.456 6 360.00 4.039 7 352.00 4.039 8 338.00 3.914 第25页,共45页，星期六，2024年，5月405nm激发下正常组织细胞荧光谱第26页,共45页，星期六，2024年，5月400nm激发下肿瘤+PSD007光敏剂荧光谱第27页,共45页，星期六，2024年，5月635nm激励下未发现荧光信号第28页,共45页，星期六，2024年，5月细胞实验研究-理想定标?离体细胞定标实验方案：激发光源：405nm连续激光器、荧光质量分析仪待测样品：纯不同浓度PSD007、孵化白血病肿瘤细胞光线探头：平头多纤芯NA=0.22医用光纤光谱仪：USB400、tristan光纤光谱仪（300-1000nm）实验内容：找到合适的光纤光谱仪积分时间。调节光纤探头位置，找到距离待测样品的合适位置。测量不同浓度下光敏剂荧光相对强度。激光激励与荧光质量分析仪两种方法下测量结果进行对比。第29页,共45页，星期六，2024年，5月荧光质量分析仪获得不同浓度PSD007光敏剂测量结果第30页,共45页，星期六，2024年，5月荧光特征峰614nm处相对强度与光敏剂浓度之间线性关系浓度范围0.019ug/ml-5ug/ml浓度范围0.019ug/ml-0.625ug/ml理想定标线性关系曲线——荧光质量分析仪第31页,共45页，星期六，2024年，5月PSD007孵化白血病肿瘤细胞测量结果——低浓度405nm光源激发下不同孵化浓度肿瘤细胞光敏剂荧光强度405nm光源激发下肿瘤细胞裂解后光敏剂荧光强度第32页,共45页，星期六，2024年，5月裂解前激发肿瘤细胞获得光敏剂荧光强度（高浓度孵化）裂解后激发纯光敏剂荧光强度（高浓度孵化）PSD007孵化白血病肿瘤细胞测量结果——高浓度第33页,共45页，星期六，2024年，5月孵化浓度为（6.25ug/ml-100ug/ml）PSD007，浸入细胞内浓度与光敏剂荧光特征峰（616nm）强度的线性关系孵化细胞后离体定标线性关系曲线——荧光质量分析仪第34页,共45页，星期六，2024年，5月光谱仪405nm激光器待测样品光纤探头高精度三维手动位移台激光器连接头光谱仪连接头第35页,共45页，星期六，2024年，5月405nm激励下PSD007的荧光光谱信号第36页,共45页，星期六，2024年，5月低浓度光敏剂与激发荧光特征峰值(614.9nm)的线性关系405nm激发下的线性标定曲线——LD光源第37页,共45页，星期六，2024年，5月405nm激光激发下白血病肿瘤细胞荧光信号裂解前细胞内光敏剂的荧光光谱信号裂解后的荧光光谱信号第38页,共45页，星期六，2024年，5月405nm激光激发裂解后提取PSD007荧光光谱注：裂解前405nm激光激发肿瘤细胞未发现荧光信号第39页,共45页，星期六，2024年，5月孵化浓度（ug/ml）100502512.56.25浸