脂质体制备试验.pdfVIP

脂质体制备试验

实验十脂质体的制备及包封率的测定

一、实验目的

1．掌握薄膜分散法制备脂质体的工艺。

2．掌握用阳离子交换树脂法测定脂质体包封率的方法.

3．熟悉脂质体形成原理，作用特点。

4．了解“主动载药”与“被动载药”的概念。

二、实验指导

脂质体是由磷脂与（或不)与附加剂为骨架膜材制成的具有双分子层结构的封闭囊状体。常见的磷脂分子

结构中有两条较长的疏水烃链和一个亲水基团，将适量的磷脂加至水或缓冲溶液中，磷脂分子定向排列,其

亲水基团面向两侧的水相，疏水的烃链彼此相对缔和为双分子层,构成脂质体。用于制备脂质体的磷脂有天

然磷脂，如豆磷脂、卵磷脂等;合成磷脂，如二棕榈酰磷脂酰胆碱,二硬脂酰磷脂酰胆碱等。常用的附加剂为

胆固醇。胆固醇也是两亲性物质，与磷脂混合使用，可制得稳定的脂质体,其作用是调节双分子层的流动性，

减低脂质体膜的通透性。其他附加剂有十八胺、磷脂酸等，这两种附加剂能改变脂质体表面的电荷性质,从

而改变脂质体的包封率、体内外其他参数。

脂质体可分为三类：小单室（层)脂质体，粒径为20~50nm,经超声波处理的脂质体,绝大部分为小单室脂

质体；多室（层）脂质体,粒径约为400～3500nm，显微镜下可观察到尤如洋葱断面或人手指纹的多层结构；

大单室脂质体,粒径约为200～1000nm,用乙醚注入法制备的脂质体多为这一类。

脂质体的制法有多种，根据药物的性质或需要进行选择。(1）薄膜分散法:这是一种经典的制备方法，

它可形成多室脂质体，经超声处理后得到小单室脂质体.此法优点是操作简便，脂质体结构典型，但包封率

较低.（2）注入法：有乙醚注入法和乙醇注入法等。“乙醚注入法”是将磷脂等膜材料溶于乙醚中，在搅拌

下慢慢滴于55~65℃含药或不含药的水性介质中，蒸去乙醚，继续搅拌1~2h，即可形成脂质体。（3）逆相蒸

发法：系将磷脂等脂溶性成分溶于有机溶剂，如氯仿中，再按一定比例与含药的缓冲液混合、乳化,然后减

压蒸去有机溶剂即可形成脂质体。该法适合于水溶性药物、大分子活性物质,如胰岛素等的脂质体制备,可提

高包封率。（4）冷冻干燥法：适于在水中不稳定药物脂质体的制备.(5）熔融法：采用此法制备的多相脂质

体，其物理稳定性好,可加热灭菌.

在制备含药脂质体时,根据药物装载的机理不同，可分为“主动载药”与“被动载药”两大类。所谓

+++

“主动载药,即通过内外水相的不同离子或化合物梯度进行载药,主要有K-Na梯度和H梯度（即pH梯度)

等.传统上,人们采用最多的方法是“被动载药”法。所谓“被动载药，即首先将药物溶于水相或有机相(脂

溶性药物)中，然后按所选择的脂质体制备方法制备含药脂质体，其共同特点是：在装载过程中脂质体的内

外水相或双分子层膜上的药物浓度基本一致，决定其包封率的因素为药物与磷脂膜的作用力、膜材的组成、

脂质体的内水相体积、脂质体数目及药脂比(药物与磷脂膜材比)等.对于脂溶性的、与磷脂膜亲和力高的药

物，“被动载药”法较为适用。而对于两亲性药物，其油水分配系数受介质的pH值和离子强度的影响较大，

包封条件的较小变化，就有可能使包封率有较大的变化.

评价脂质体质量的指标有粒径、粒径分布和包封率等。其中脂质体的包封率是衡量脂质体内在质量的一

个重要指标。常见的包封率测定方法有分子筛法、超速离心法、超滤法等。本文采用阳离子交换树脂法测定

包封率。“阳离子交换树脂法”是利用离子交换作用，将荷正电的未包进脂质体中的药物(即游离药物)，如

45

脂质体制备试验

本实验中的游离的小檗碱，被阳离子交换树脂吸附除去。而包封于脂质体中的药物（如小檗碱），由于脂质

体荷负电荷，不能被阳离子交换树脂吸附,从而达到分离目的，用以测定包封率.