2024年蟾蜍骨骼肌兴奋收缩实验 实验报告.docx

生理科学试验汇报

试验1：蟾蜍骨骼肌兴奋收缩试验

试验组组员：刘谨、杨莹莹、张敏霞

浙江大学医学院临床医学（七年制）1008班

【摘要】试验目的：学习使用RM6240多道生理信号采集处理系统和换能器的使用。掌握制备具有正常兴奋收缩功能的蛙类坐骨神经-腓肠肌标本基本操作技术。观测不一样刺激强度、频率对肌肉收缩的影响。观测神经-肌肉接头兴奋传递和骨骼肌兴奋的电变化与收缩之间的時间关系及其各自特点。

【关键詞】神经-肌肉、刺激强度、频率、电位变化、张力变化

【试验原理】蛙类的某些基本生命活动和生理功能与哺乳类动物有相似之处，并且其离体组织的生活条件比较简朴，易于控制和掌握。因此，蛙或蟾蜍的坐骨神经-腓肠肌标本常被用来观测神经-肌肉的兴奋性、刺激与反应的规律及肌肉收缩特点等试验。肌肉组织的兴奋重要体現為收缩活动，一种刺激与否能使组织发生兴奋，不仅与刺激形式有关还与刺激時间、强度、强度-時间变化三要素有关，若用方形电脉冲刺激则组织兴奋只与刺激强度、時间有关，终板电位可引起肌肉产生兴奋在宏观上体現為肌肉收缩。肌肉的收缩形式不仅与刺激自身有关并且还与刺激频率有关。若刺激频率较小，则体現為单收缩，逐渐增大刺激频率则变現為不完全强直收缩，继续增强则体現為完全强直收缩。

【试验环节】

试验材料

1.1试验动物：蟾蜍

1.2试验试剂：任氏液，甘油高渗任氏液

1.3试验器材：一维微调器，BB-3G屏蔽盒，针形引导电极，张力换能器，RM6240多道生理信号采集处理系统

2.试验措施

2.1蟾蜍坐骨神经神经-肌肉标本的制作

取蟾蜍一只常规措施毁脑脊髓，剪断脊柱并且剪除蟾蜍躯干上部以及内脏，避开神经剥除蟾蜍的皮肤，于任试液中清洗，剪除骶骨分离坐骨神经于坐骨神经根部結扎，将标本固定于木板上，分离大腿部坐骨神经，直至分离至腘窝胫神经分叉处。然后剪断股二头肌腱、半腱肌和半膜肌肌腱，并绕至前方剪断股四头肌腱。用剪刀刮除股骨上的肌肉，在距膝关节省1cm处剪断股骨。在腓肠肌肌腱处結扎然后剪断分离出坐骨神经-腓肠肌，并置于任试液中待用。

2.2试验系统连接和参数设置

张力换能器输入RM6240系统第一通道，刺激输出接标本盒刺激电极。启动计算机和RM6240多道生理信号采集处理系统的电源。启动RM6240多道生理信号采集处理系统软件，在其窗口点击“试验”菜单那，选择“刺激强度（或频率）对骨骼肌收缩的影响”项。仪器参数：第1通道模式為张力。采集频率400Hz~1kHz，扫描速度1s/div，敏捷度10~30g，時间常数為直流，滤过频率100Hz。在“选择”下拉菜单中选择“强度/频率”项，显示刺激参数。

2.3试验装置连接

将离体的坐骨神经腓肠肌标本的股骨插入标本盒的固定孔中，旋转固定螺钉固定标本，腓肠肌的跟腱結扎线系于张力换能器的悬臂梁上。坐骨神经放在刺激电极上，保持神经与电极接触良好。调整一维微调器，将前负荷调至2g。

2.4试验观测项目

2.4.1毁脑脊髓前后蟾蜍四肢肌张力的变化。用锌铜弓分别刺激坐骨神经和腓肠肌，观测肌肉的反应。

2.4.2刺激强度对骨骼肌收缩的影响刺激方式：单次，刺激波宽：0.1ms。电极记录窗口的记录按钮，开始记录，按刺激器的“刺激”按钮，刺激强度从0.1V逐渐增大，强度增量為0.05V，持续记录肌肉收缩曲线。记录阈刺激与阈刺激時的张力和最大刺激与最大刺激是的张力。

2.4.3刺激频率对骨骼肌收缩的影响将刺激强度设置為最大刺激强度，波宽：0.1ms。刺激模式為频率递增方式，起始频率1Hz，步長為1Hz，组间延時不小于10s，持续记录不一样频率是的收缩曲线，观测不一样刺激频率時的肌肉收缩张力变化。

2.4.3同步记录神经干动作电位、骨骼肌动作电位、肌肉收缩曲线。通道1记录肌张力、通道2记录肌膜电位、通道3记录神经干电位。刺激模式為双刺激，刺激强度為最大刺激强度，刺激波宽為0.1ms，同步出发。针形引导电极插入腓肠肌并固定。观测记录刺激间隔0.5、2、10ms状况下神经干动作电位、肌膜电位波形和腓肠肌的收缩曲线。

2.4.4观测甘油高渗任试液处理肌肉后的肌肉动作电位和收缩用浸润20%~30%甘油高渗任试液的棉花包裹腓肠肌，每隔30s用单刺激标本一次。记录出既有动作电位无腓肠肌收缩的時间。

2.5记录措施成果以表达，记录学分析采用Student’st-test措施。

【试验成果】

3.1蟾蜍坐骨神经干阈刺激是0.540±0.211V,此時的收缩张力為1.437±0.828g，最大刺激為0.999±0.409V,此時的收缩张力為11.162±5.797g。阈强度刺激時的肌肉收缩力1.437±0.828g明显低于最大刺激强度刺激時的肌肉收缩力11.162±5.797

表1不一样