细菌超广谱内酰胺酶与耐药性.ppt

4、分子生物学检测聚合酶链式反应(PCR)参照GenBank已发表的TEM、SHV、CTX-M和OXA各亚型的基因序列，分别设计特异性引物第31页,共39页，星期六，2024年，5月5、总结ESBLs的检测方法表型初筛试验初步判断表型确证试验最终确认三相水解试验确认菌株是否只产ESBLsE-test法分子生物学检测第32页,共39页，星期六，2024年，5月（四）ESBLs的防治(1)开发能够相对或绝对能够抵抗β－内酰胺酶水解的新型抗菌药物。(2)应用β-内酰胺酶抑制剂(3)规范抗生素的使用第33页,共39页，星期六，2024年，5月（一）β-内酰胺酶抑制剂β-内酰胺酶抑制剂是一种β-内酰胺类药物，可与β-内酰胺酶发生牢固的结合而使酶失活，和其他抗生素联用可增强抗菌活性，减少其用量。第34页,共39页，星期六，2024年，5月（二）β-内酰胺酶抑制剂分类按作用分为三类：（1）可逆性竞争性抑制剂：邻氯西林、双氯西林等（2）不可逆竞争性抑制剂：克拉维酸、舒巴坦等（3）非竞争性抑制剂：甲氧西林等第35页,共39页，星期六，2024年，5月β-内酰胺酶β-内酰胺类抗生素β-内酰胺酶克拉维酸不可逆竞争性抑制药物分解，细菌存活酶失活，药物起作用第36页,共39页，星期六，2024年，5月β-内酰胺酶邻氯西林+邻氯西林可逆性竞争性抑制第37页,共39页，星期六，2024年，5月(三)合理使用抗生素有报道显示抗生素尤其是第三代头孢菌素的应用与ESBLs的感染流行有关。敏感菌因抗生素的选择性压力而被大量杀灭后，耐药菌得以大量繁殖而成为优势菌，同时抗生素的选择性压力也加快了细菌突变的速度。因此合理使用抗生素并采取有效的消毒隔离措施，才是预防ESBLs产生的最好方法。第38页,共39页，星期六，2024年，5月感谢大家观看第39页,共39页，星期六，2024年，5月关于细菌超广谱内酰胺酶与耐药性细菌超广谱β－内酰胺酶与耐药性1、什么是β－内酰胺类抗生素？2、什么是β－内酰胺酶？3、什么是超广谱β－内酰胺酶？4、它们与细菌耐药有什么关系？第2页,共39页，星期六，2024年，5月一、β－内酰胺类抗生素青霉素发现者、英国科学家弗莱明（1928）（一）概念β-内酰胺类抗生素（β-lactams）指化学结构中具有β-内酰胺环的一大类抗生素。第3页,共39页，星期六，2024年，5月第4页,共39页，星期六，2024年，5月第5页,共39页，星期六，2024年，5月第6页,共39页，星期六，2024年，5月(二)β－内酰胺类抗生素抑制细菌的机理N-乙酰葡萄糖胺双糖十肽转肽酶N-乙酰胞壁酸五肽聚合物（PBPs）粘肽（构成细胞壁）β－内酰胺类抗生素（－）胞浆内细胞膜细胞膜外第7页,共39页，星期六，2024年，5月第8页,共39页，星期六，2024年，5月细胞壁合成受阻，细胞壁缺损，外环境水分渗入到菌体，菌体膨胀裂解而死。第9页,共39页，星期六，2024年，5月第10页,共39页，星期六，2024年，5月二、β－内酰胺酶（一）概念β-内酰胺酶（β-lactamase）是细菌产生的可水解β-内酰胺类抗生素的酶。绝大多数常见的β-内酰胺酶有一个依赖丝氨酸发挥作用的机制。通常它们的活性位点具有一个狭窄的纵形沟状结构，在沟的底部形成了一个空腔（氧阴离子袋），这种疏松的构造容易弯曲，便于结合底物。第11页,共39页，星期六，2024年，5月（二）、β-内酰胺酶是细菌耐药的机理丝氨酸的结构式第12页,共39页，星期六，2024年，5月β-内酰胺环上的羰基碳在结合β内酰胺酶活性部位的丝氨酸时发生了不可逆的反应，结果使其成为开环物。第13页,共39页，星期六，2024年，5月（三）β-内酰胺酶分类方法一、Bush-M-J分类法（功能分类法）根据β-内酰胺酶的功能相似性（底物和抑制物的轮廓）分为1，2，3，4四组，其中2组和3组又分为很多亚组。二、Ambler分类法（分子分类法）根据酶的氨基酸序列的保守性和相似性将β-内酰胺酶分为A，B，C，D四组。第14页,共39页，星期六，2024年，5月克拉维酸第15页,共39页，星期六，2024年，5月