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;一、红细胞的发育过程;成熟红细胞
120天;形态:双凹圆盘状;
直径:6~9μm,平均7.2μm;
厚度:边缘部分约2μm,中央约1μm
侧面观呈哑铃形。
;血涂片经瑞特染色后,细胞呈粉红色,中央着色较淡,有明显的中央淡染区,淡染区的直径约占红细胞直径的1/3~2/5。;红细胞皱缩,边缘呈锯齿状;;红细胞肿涨甚至破裂,血红蛋白逸出后形成影细胞。;功能:;三、红细胞计数;同WBC计数;【稀释液】;1.甲醛枸橼酸盐稀释液
成分功能
枸橼酸钠抗凝、维持渗透压
36%甲醛液防腐并固定红细胞
氯化钠维持渗透压
蒸馏水;2.Hayem稀释液
成分功能
氯化钠调节渗透压
硫酸钠提高相对密度,防止细胞粘连
氯化高汞防腐剂
蒸馏水
;【操作】;↓
计数:高倍镜下中央大方格
五个中方格的RBC
↓
计算:
RBC/L=五个中方格的RBC
×5×10×200×106
↓
报告:RBC:△.△△×1012/L;1.血量要准确。
2.稀释液要过滤。
3.红细胞计数池内要分布均匀。
4.实验器材应清洁干燥。
5.自身凝集素增高者,宜用不含甲醛的枸橼酸盐稀释液。
6.同时做白细胞计数、红细胞计数、血红蛋白测定,应先取红细胞计数用血。
;计数误差;(二)血细胞分析仪技术法;;;一、Hb的结构;;在生理条件下,99%Hb的铁呈Fe2+,称为还原血红蛋白(Hbred);Fe2+状态的Hb与氧结合称氧合血红蛋白(HbO2);
1%Hb的铁呈Fe3+,称为高铁血红蛋白(Hi);
如与氧结合的配位键被CO或S占据,则变为碳氧血红蛋白(HbCO)或硫化血红蛋白(SHb)。;二、血红蛋白测定;HiCN测定法是WHO和ICSH推荐的参考方法,由于HiCN试剂含有剧毒的氰化钾,各国均相继研发出不含氰化钾的血红蛋白测定方法,有的测定法已用于血液分析仪,但其标准应溯源到HiCN量值。血红蛋白测定的方法学评价见表2-8。;【原理】
表面活性剂溶解红细胞膜,释放血红蛋白。血红蛋白被高铁氰化钾氧化为高铁血红蛋白(Hi),在一定的PH值下,Hi与氰离子(CN-)结合生成稳定棕红色氰化高铁血红蛋白(HiCN)。HiCN在540nm处有一吸收峰,测定其吸光度,可???得血红蛋白浓度(g/L)。
;;试剂配成后用滤纸过滤,置棕色玻瓶中(不能用塑料瓶!),塞紧后保存于冷暗处,勿使结冰,可保存数月。
此液应呈透明、淡黄色,pH在7.0~7.4之间,以蒸馏水作空白,用540nm比色,吸光度应<0.001。若变浑、变绿或发生混浊则应废弃。;【操作】;;;【质量控制】;;红细胞的异常形态检验;回顾:正常红细胞形态;1.小红细胞
直径小于6μm称小红细胞,正常人偶见。出现较多中央淡染区扩大的小红细胞,提示血红蛋白合成减少,多见于缺铁性贫血。;2.大红细胞
直径大于10μm称为大红细胞,有时中央淡染区不明显,见于巨幼细胞性贫血。;3.巨红细胞
直径大于15μm者称巨红细胞,常见于巨幼细胞性贫血。肝脏疾病等。;4.红细胞大小不均红细胞之间直径相差一倍以上者称为红细胞大小不均,常见于增生性贫血及巨幼细胞性贫血。;1.球形红细胞
球形红细胞直径<6μm,厚度>2μm,呈小圆球形,无中央淡染区。血片中此类细胞达25%时有诊断参考价值,常见于遗传性球形细胞增多症,自身免疫性溶血性贫血、异常血红蛋白病等。;2.椭圆形红细胞
呈长椭圆形,甚至呈长柱形,长度大于宽度的3倍~4倍。正常人偶见,但最多不超过15%。常见于遗传性椭圆形红细胞增多症,可达25%~75%,巨幼细胞贫血和恶性贫血时也常见。;3.靶形红细胞
红细胞中心深染,其外周淡染,而细胞边缘又深染,形状如射击之靶。常见于地中海贫血、严重缺铁性贫血,其他异常血红蛋白病。;4.口形红细胞
红细胞中央淡染区呈裂口状狭孔。正常人<4%,增高见于遗传性口形红细胞增多症,急性乙醇中毒和DIC时也可见少量口形红细胞。;5.镰刀形红细胞
红细胞狭长似镰刀,也有呈麦粒状或冬青叶状。主要见于HbS病。;6.棘形红细胞
红细胞表面带有长短不一的针刺状或尖刺状突起,其间距不规则,突起的长度和宽度也不一致。见于遗传性血浆β-脂蛋白缺乏症。;7.锯齿红细胞
锯齿红细胞也称短棘形红细胞,细胞表面突起较棘形红细胞短,但分布较均匀。主要见于尿毒症等疾病.;8.泪滴形红细胞
红细胞形态似泪滴样、手镜形或梨状,正常人外周血少见,
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