血细胞分析仪检测原理（临床检验技术课件）.pptx

;细胞计数测定原理;电阻抗法是三分群血液分析仪的核心技术，可准确测出细胞（或类似颗粒）的大小和数量。;;根据电阻抗原理，不同体积的白细胞通过小孔时产生的脉冲大小有明显的差异，依据脉冲的大小，血细胞分析仪可对白细胞进行分群。三分群法的第一群为小细胞区，体积为35～90f1，主要为淋巴细胞；第二群为中间细胞区也称单个核细胞区，体积90～160fl，包括幼稚细胞、单核细胞、嗜酸性细胞、嗜碱性细胞；第三群为大细胞区，体积160f1以上，主要为中性粒细胞。;;;;;;白细胞五分类计数原理

（1）容量、电导、光散射（VCS）原理

①体积（V）测量技术：应用电阻抗原理测量细胞体积；

②电导（C）技术：采用高频电磁探针测量细胞内部结构，如细胞核、细胞质比例、细胞内颗粒；

③光散射（S）技术：激光源的单色光直接扫描计数敏感区细胞，根据细胞产生的不同角度散射光（10°～70°），提供细胞形态、胞核结构等光散射信息，并鉴别细胞颗粒的构型和颗粒质量，细胞粗颗粒的光散射要比细颗粒更强，以此区别粒细胞类型。

;图3-10体积（V）、电导（C）和光散射（S）法;（2）双鞘流技术和细胞化学染色原理

①标本在第一鞘流液中经过电阻抗分析，得到细胞体积，第二鞘流液对进行光吸收率分析，对细胞内容物进行测定。

②溶血后对白细胞进行染色，染色后的标本进入鞘流池进行双鞘流分析，由于淋巴、单核、中性以及嗜酸细胞对染色剂的着色程度不同，细胞结构的光散射程度不同，产生特定吸光率。

③嗜碱性粒细胞具有抗酸性，在WBC/BASO通道保持形态完整，其他白细胞胞质溢出成为裸核，根据电阻抗得到嗜碱性粒细胞直方图。

;（3）激光散射和细胞化学染色原理

①细胞被激光束照射时，因自身体积大小、细胞成分、细胞核密度、染色程度等的不同，阻挡或改变激光束的方向，产生与细胞特征相对应的各种角度的散射光。

②细胞化学染色如POX通道，利用POX在不同白细胞中的含量不同，染色后出现不同程度的阳性或阴性，从而对细胞进行分类。;（4）电阻抗、射频、流式细胞术和细胞化学染色原理

射频（RF）是??种高频交流电磁波，反应细胞密度。流式细胞术（FCM）采用半导体激光照射在通过鞘流技术处理的细胞上，每个细胞产生三种信号，前向散射光（FSC）信号反映细胞体积大小，侧向散射光（SSC）信号反应细胞的颗粒和细胞核等内含物信息，侧向荧光（SFL）强度信号用于分析细胞内DNA和RNA的含量。;;;（5）多角度偏振光散射方法（MAPSS）

应用激光流式细胞术，分4个角度检测细胞。