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非离子表面活性剂抗菌活性影响因素的研究
摘要本文以环境中常见的假单胞绿脓杆菌为代表菌株,用多通道压电微生
物传感仪监测非离子表面活性剂的亲水基、亲油基的抗菌活性。
关键词非离子;表面活性剂;抗菌
表面活性剂有工业味精之称,最近几年,表面活性剂膜在食品加工、纺织、
冶金、生物制药、新型材料以及环境保护等行业的新产品、新技术开发中都有相
当广泛的应用,具有极高的经济与社会应用价值。同时,表面活性剂传感器同样
在环境污染控制方面有着重要的作用。但是,随着其使用量的增加,大量的表面
活性剂在使用之后没有通过任何的处理就被排入到江河湖泊等自然水体当中,不
但对自然界水环境造成了相当严重的危害,而且还对土壤的结构、土壤微环境以
及其生态恢复能力造成较为严重的危害,对整个生态系统产生了负面影响。其中,
尤其是非离子表面活性剂,其应用最为广泛。因此,研究非离子表面活性剂的抗
菌活性影响因素,对表面活性剂的生物降解提供理论支持具有积极意义。
研究表面活性剂生物降解的方法与路径很多,但是这些操作方法在实际的应
用过程中依然存在着程序繁琐、检验耗时以及处理成本较高等问题。其中,多通
道压电微生物传感仪(MSPQC)已经被广泛应用在化学生物学检测领域。同时,
在试验过程中以绿脓杆菌作为需要处理的假单胞菌属典型代表,其广泛的分布在
水体和土壤中,具有广泛的代表性。本文用MSPQC监测非离子表面活性剂对绿
脓杆菌生长的影响,有普遍意义。
1实验部分
1.1实验试剂与仪器
非离子表面活性剂(全部都是由上海盛众精细化工有限公司所提供)十五烷
基脂肪醇聚氧乙烯醚AEO-15,椰油基单乙醇酰胺聚氧乙烯醚SFC-915、三种壬
基酚聚氧乙烯醚NPE-30、NPE-15和NPE-7,均为化学纯;P.aeruginosa由中南
大学湘雅三医院检验科提供。
LRH-250A型生化培养箱(广东省医疗器械);多通道串联式压电微生物传
感仪(MSPQC)(湖南大学生物传感与化学计量国家重点实验室研制)。
1.2MSPQC专用培养基
牛肉浸膏2g,葡萄糖10g,YC营养液20ml,酵母浸膏1g,蒸馏水1000ml,
pH=7.3。
1.3实验方法
首先需要配制浓度不同的几种表面活性剂YC培养基,同时取出10mL,将
之加入到检测池中,并接种1mLP.aeruginosa菌液(5×106cells/mL),密封检测
池,37℃孵育,每隔13min仪器自动采集一个频率值(Fi),所有实验重复5次。
2结果与讨论
2.1亲水基中乙氧基数目对细菌生长的影响
本文考察了含不同乙氧基数目的聚氧乙烯醚系列(壬基酚聚氧乙烯醚
NPE-7,NPE-15,NPE-30)对P.aeruginosa生长的影响。NPE-7、NPE-15和NPE-30
在YC培养基中的浓度均为1×10-2g/L时,与不含表面活性剂的空白试验对照,
结果表明都对P.aeruginosa的生长影响不大。
随着浓度的持续增加,三种不同乙氧基数目的表面活性剂对P.aeruginosa生
长长沙的影响差别增加。P.aeruginosa在含浓度为8×10-2g/LNPE-30培养基中的
生长曲线表明,频移值大于空白试验的频移值,而细菌检出时间快,表明NPE-30
明显促进了P.aeruginosa的生长。此外,含NPE-30培养基中的P.aeruginosa出现
了两个指数生长期,这主要是因为葡萄糖效应以及表面活性剂降解之后得到的产
物引发的综合结果。
8×10-2g/L的NPE-15明显使得P.aeruginosa检出时间比空白试验的拖后,而
频移值变小,生长受到抑制。在含NPE-7培养基中P.aeruginosa同样显现出了两
个指数生长期,但是根据试验情况来看,其显现的指数期内生长速度要明显慢于
NPE-30中的速度,而且频移值小于空白试验的频移值,说明浓度均为8×10-2g/L
时,NPE-7比NPE-30难降解。
比较分析含相同浓度的NPE-7,NPE-15,NPE-30的培养基中,P.aeruginosa
的生长曲线频移值越小,细菌生长受到的抑制就越厉害。NPE-30的降解比
NPE
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