蟾蜍骨骼肌兴奋收缩实验实验报告 .pdfVIP

生理科学实验报告

实验1：蟾蜍骨骼肌兴奋收缩实验

实验组成员：刘谨、杨莹莹、张敏霞

浙江大学医学院临床医学（七年制）1008班

【摘要】实验目：学习使用RM6240多道生理信号采集处理系统和换

能器使用。掌握制备具有正常兴奋收缩功能蛙类坐骨神经-腓肠肌标本基

本操作技术。观察不同刺激强度、频率对肌肉收缩影响。观察神经-肌肉

接头兴奋传递和骨骼肌兴奋电变化和收缩之间时间关系及其各自特点。

【关键词】神经-肌肉、刺激强度、频率、电位变化、张力变化

【实验原理】蛙类某些基本生命活动和生理功能和哺乳类动物有相似

之处，而且其离体组织生活条件比较简单，易于控制和掌握。因此，蛙或

蟾蜍坐骨神经-腓肠肌标本常被用来观察神经-肌肉兴奋性、刺激和反应规

律及肌肉收缩特点等实验。肌肉组织兴奋主要表现为收缩活动，一个刺激

是否能使组织发生兴奋，不仅和刺激形式有关还和刺激时间、强度、强度

-时间变化三要素有关，若用方形电脉冲刺激则组织兴奋只和刺激强度、

时间有关，终板电位可引起肌肉产生兴奋在宏观上表现为肌肉收缩。肌肉

收缩形式不仅和刺激本身有关而且还和刺激频率有关。若刺激频率较小，

则表现为单收缩，逐渐增大刺激频率则变现为不完全强直收缩，继续增强

则表现为完全强直收缩。

【实验步骤】

1.实验材料

1.1实验动物：蟾蜍

1.2实验试剂：任氏液，甘油高渗任氏液

1.3实验器材：一维微调器，BB-3G屏蔽盒，针形引导电极，张力换能

器，RM6240多道生理信号采集处理系统

2.实验方法

2.1蟾蜍坐骨神经神经-肌肉标本制作

取蟾蜍一只常规方法毁脑脊髓，剪断脊柱并且剪除蟾蜍躯干上部以

及内脏，避开神经剥除蟾蜍皮肤，于任试液中清洗，剪除骶骨分离坐

骨神经于坐骨神经根部结扎，将标本固定于木板上，分离大腿部坐骨

神经，直至分离至腘窝胫神经分叉处。然后剪断股二头肌腱、半腱肌

和半膜肌肌腱，并绕至前方剪断股四头肌腱。用剪刀刮除股骨上肌肉，

在距膝关节约1cm处剪断股骨。在腓肠肌肌腱处结扎然后剪断分离出

坐骨神经-腓肠肌，并置于任试液中待用。

2.2实验系统连接和参数设置

张力换能器输入RM6240系统第一通道，刺激输出接标本盒刺激电

极。开启计算机和RM6240多道生理信号采集处理系统电源。启动

RM6240多道生理信号采集处理系统软件，在其窗口点击“实验”菜单

那，选择“刺激强度（或频率）对骨骼肌收缩影响”项。仪器参数：

第1通道模式为张力。采集频率400Hz~1kHz，扫描速度1s/div，灵敏

度10~30g，时间常数为直流，滤过频率100Hz。在“选择”下拉菜单

中选择“强度/频率”项，显示刺激参数。

2.3实验装置连接

将离体坐骨神经腓肠肌标本股骨插入标本盒固定孔中，旋转固定螺

钉固定标本，腓肠肌跟腱结扎线系于张力换能器悬臂梁上。坐骨神经

放在刺激电极上，保持神经和电极接触良好。调节一维微调器，将前

负荷调至2g。

2.4实验观察项目

2.4.1毁脑脊髓前后蟾蜍四肢肌张力变化。用锌铜弓分别刺激坐骨神

经和腓肠肌，观察肌肉反应。

2.4.2刺激强度对骨骼肌收缩影响刺激方式：单次，刺激波宽：0.1ms。

电极记录窗口记录按钮，开始记录，按刺激器“刺激”按钮，刺激强

度从0.1V逐渐增大，强度增量为0.05V，连续记录肌肉收缩曲线。记

录阈刺激和阈刺激时张力和最大刺激和最大刺激是张力。

2.4.3刺激频率对骨骼肌收缩影响将刺激强度设置为最大刺激强度，

波宽：0.1ms。刺激模式为频率递增方式，起始频率1Hz，步长为1Hz，

组间延时大于10s，连续记录不同频率是收缩曲线，观察不同刺激频率

时肌肉收缩张力变化。

2.4.3同步记录神经干动作电位、骨骼肌动作电位、肌肉收缩曲线。

通道1记录肌张力、通道2记录肌膜电位、通道3记录神经干电位。

刺激模式为双刺激，刺激强度为最大刺激强度，刺激波宽为0.1ms，同

步出发。针形引导电极插入腓肠肌并固定。观察记录刺激间隔0.5、2、

10ms情况下神经干动作电位、肌膜电位波形和腓肠肌收缩曲线。

2.4.4观察甘油高渗任试液处理肌肉后肌肉动作电位和收缩用浸润

20%~30%甘油高渗任试液棉花包裹腓肠肌，每隔30s用单刺激标本一次。

记录出现有动作电位无腓肠肌收缩时