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第六节代谢调节代谢调节第六节代谢调节温敏突变株的筛选定义诱变富集筛选抗生素法过滤或离心法H3前体法第六节代谢调节重层琼脂法多次分离敏感菌离心上清为高效价噬菌体效价测定诱变平板分离摇瓶分离抗性测定被感染后的噬菌斑敏感菌纯化高效价噬菌体的制备效价(U/ml)=平均每皿噬菌斑数×稀释倍数÷取样量第六节代谢调节第八章工业微生物代谢控制育种生物合成途径代谢调节机制解除或绕过代谢途径有用产物大量积累第六节代谢调节第一节概论新陈代谢:初级代谢次级代谢第六节代谢调节一、初级代谢(primarymatabolism)通常把微生物产生的对自身生长和繁殖必须的物质称为初级代谢产物。而产生这些物质的代谢体系称为初级代谢。分解代谢体系素材性生物合成结构性生物合成体系第六节代谢调节二、次级代谢(secondarymatabolism)次级代谢产物是指对产生他们的生物体本身不需要的一种产物。第六节代谢调节三、初级代谢与次级代谢的关系次级代谢是初级代谢衍生出来的。基本代谢途径有7种:葡萄糖碳架掺入途径莽草酸途径与核苷有关的途径聚酮体和聚丙酸途径由氨基酸衍生途径甲羟戊酸途径其他复合途径第六节代谢调节第二节初级代谢的调节控制酶合成量调节(反馈阻遏)酶活力调节(反馈抑制)第六节代谢调节一、基本概念1诱导(Induction)同时诱导顺序诱导2阻遏(Repression)末端产物阻遏(endproductrepression)分解代谢阻遏(cataboliterepression)第六节代谢调节IoperonpromoteroperatorpOZYRegulatorgenestucturegeneRegulatoryproteinEffectorinducercorepressorrepressoraporepressor酶合成调节操纵子第六节代谢调节IoperonpromoteroperatorpOZYRegulatorgenestucturegeneRegulatoryproteininducerrepressorRNAploymaseCAP或CRPcAMP+诱导型操纵子第六节代谢调节IoperonpromoteroperatorpOZYRegulatorgenestucturegeneRegulatoryproteincorepressoraporepressorRNAploymase阻遏操纵子第六节代谢调节二、酶活性的调节前体激活:指在分解代谢途径中,后面的反应可被较前面的中间产物所促进。反馈抑制:指某代谢途径的末端产物过量时,这个产物可反过来直接抑制该途径中第一个酶的活性,促进整个反应过程减慢或停止从而避免了末端产物过量积累。第六节代谢调节(一)反馈抑制类型(1)直线式代谢途径中的反馈抑制苏氨酸α-酮丁酸异亮氨酸苏氨酸脱氢酶反馈抑制第六节代谢调节(2)分支代谢途径中的反馈抑制优先合成:分支途径中一个终产物优先合成,浓度过量后,抑制自身合成途径,使代谢转向合成另一个终产物。例如黄色短杆菌优先合成谷氨酸,当谷氨酸过量后,使代谢转向合成天冬氨酸。第六节代谢调节ABCDFEGIJ协同反馈抑制(concertedfeedbackinhibition)合作反馈抑制累积反馈抑制顺序反馈抑制ABCDFEGABCDFEGABCDFEG第六节代谢调节同功酶调节(isoenzyme)ABCDFEG第六节代谢调节(二)反馈阻遏和反馈抑制的比较反馈阻遏反馈抑制调节对象调控开关调控的水平调控的方式调控的动作形成的控制酶的合成终产物浓度DNAmRNA蛋白质终产物与阻遏蛋白亲和力阻遏蛋白与操纵基因结合不能合成RNA开关控制酶活性终产物浓度酶蛋白构象终产物与变构亲和力酶构象发生变化控制酶活性的大小第六节代谢调节第三节次级代谢的调节控制抗生素的生物合成途径中,反馈调节作用包括:抗生素本身积累就能起反馈调节作用初级代谢产物作为抗生素合成的前体,当其受到反馈调节时,必然会影响抗生素的合成。第六节代谢调节一、次级代谢产物的诱导调节诱导机制可能按两种方式进行:诱导
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