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104临床检验杂志2007年第25卷第2期ChineseJournalofClinicalLaboratoryScience,2007,Vo1.25,No.2
文章编号:1o01.764x(2007)02-0104-03中图分类号:R392.12文献标识码:A・实验研究・
急性ITP患儿外周血CD4+CD25+T细胞及相关细胞
因子的研究
吕学文,刘仿,伍昌林,肖红(1.广东医学院微生物免疫学教研室,广东湛江524023;2.广东医学院附属医院儿科,广东
湛江524001)
摘要:目的检测急性特发性血小板减少性紫癜(ITP)患儿外周血CD4CD25调节性T细胞(TR)及相关细胞因子的变化,探
讨它们在ITP发病机制中的作用。方法用流式细胞仪检测外周血T细胞的数量,ELISA法检测血浆中相关细胞因子的含
量。结果ITP患儿外周血T细胞的百分率显著低于正常对照组[(2.83±1.05)%VS(5.07±0.59)%,P<0.05];ITP患儿
血清中IL.10、TGF.B。的含量也显著低于正常对照组[IL一10:(29.48±13.69)pg/mVS(43.1l0±14.95)pg/ml;TGF—Bl:(170.04
±91.58)pg/mlVS(254.75±130.41)pg/ml,P<0.05]。ITP患儿外周血TR细胞在CD4细胞中所占比例与血清中IL一10、TGF—
B。的含量均呈正相关(r,=0.54,r=0.66,P<0.05)。结论急性ITP患儿外周血中TR细胞数量的减少及相关细胞因子含
量的降低可能与急性ITP患儿的细胞免疫失调有关。
关键词:急性特发性血小板减少性紫癜;调节性T细胞;IL一10;TGF—B1
急性特发性血小板减少性紫癜(idiopathic1.3外周血CD4CD25T细胞检测取肝素抗
thrombocytopenicpurpura,ITP)是一种儿童常见的免凝血100p.1,分别加入抗CD4一FITC、抗CD25-PE单
疫性出血性疾病,在我国发病率呈上升趋势,发病机抗各20l(同型对照分别为IgG-FITC,IgG一PE),
制不明,尚无特异而有效的治疗方法。CD4CD25混匀,避光温育25~30min。加入流式细胞检测试
调节性T细胞(regulationTcell,T细胞)是维持机剂2ml混匀,室温避光温育15min,至液体澄清透
体免疫耐受的重要调控者,在自身免疫病中的作用明,1000r/arin离心5min,弃上清。加入2mPlBS
已引起关注。为探讨T细胞与ITP发生、发展的关洗涤液混匀,1000r/arin离心5min,弃上清。将细
系及其临床意义,我们用流式细胞术和ELISA法分胞悬浮于0.5mPlBS洗涤液中,振荡混匀后上机检
析患JL#b周血中T细胞及相关细胞因子的变化。测。
1材料及方法1.4细胞因子检测患儿和健康儿童肝素抗凝血
1.1研究对象30例急性ITP患儿系广东医学院5ml,室温静置30min后,离心分离血浆冻存于一70
附属第一医院和附属湛江中心医院住院病人,男11℃。同批用ELISA法分别测IL.10、TGF.B1的含量。
例女19例,年龄2月~8岁,平均(3.74-4.4)岁,1.5统计学处理全部数据均经SAS8.22统计软
均符合急性ITP诊断标准,于用药前取外周血肝素件分析。数据用元-a-表示,组间差异的显著性用成
抗凝;正常对照为30例健康体检者,男12例,女18组t检验,两变量的相关程度用直线相关分析法。
例,年龄3~9岁,平均(6.34-3.2
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