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维普资讯
实用医学杂志２００７年第２３卷第ｌ】期（
三氧化二砷联合抗坏血酸增强人多发性
骨髓瘤细胞凋亡的实验研究
郝艳梅张林杰李玉云吴俊英
摘要目的：探讨三氧４ｅ．￣－砷（ＡｓＯ，）联合抗坏血酸（ＡＡ）对人多发性骨髓瘤细胞株Ｕ２６６细胞生长抑制及
诱导凋亡作用。方法：四甲基噻唑氮蓝比色法检测Ａｓ０，联合ＡＡ对Ｕ２６６细胞生长抑制作用；流式细胞术检测Ａｓｚ０，
联合ＡＡ对Ｕ２６６细胞周期和凋亡率的影响。结果：单用ＡＡ对Ｕ２６６细胞生长无影响，单用５￣ｍｏｌ／ＬＡｓｚＯ３对Ｕ２６６
细胞生长有一定影响．Ａｓ０联合ＡＡ较单用ＡｓＯ，对Ｕ２６６细胞生长抑制作用显著（尸＜Ｏ．０５）。与单用Ａｓｚ０３相比，
Ａｓ，０联合ＡＡ作用于Ｕ２６６细胞４８ｈ后．细胞凋亡率显著增加（Ｐ＜Ｏ．０５），Ｇｏ／Ｇｌ期细胞比例升高，Ｓ期细胞减少。
结论：ＡＡ－＊ｊ－ｖｘ增强Ａｓ０３对Ｕ２６６细胞诱导凋亡作用。
关键词多发性骨髓瘤抗坏血酸砷剂凋亡
多发性骨髓瘤（ｍｕｌｔｉｐｌｅｍｙｅｌｏｍａ，ＭＭ）是一种浆（根据参考文献及多次预实验确定）。ＡｓＯ，组加入
细胞恶性增殖性疾病，主要表现为骨髓内浆细胞恶性Ａｓ２０，使其终浓度为５￣ｍｏｌＩ／Ｌ。ＡＡ＋ＡｓＯ３组同时加
克隆性增生，从而破坏骨髓，晚期合并多脏器功能衰入ＡＡ和Ａｓ２０，，各孑Ｌ细胞悬液中Ａｓ２０，的终浓度均为
竭目前．ＭＭ的治疗仍然是一个世界性的难题，特别５￣ｍｏｌＩ／Ｌ．ＡＡ的终浓度分别为１０、１００、１０００￣ｍｏｌＩ／
是对于晚期、复发和耐药患者尚无令人满意的治疗药Ｌ。加药后ｌ２、２４、４８、７２ｈ收集细胞。
物。已有的研究表明三氧化二砷（Ａｓ２０，）在体外能够１．３．３ＭＴＹ实验用含１０％ｄｘ牛血清的ＲＰＭＩ一１４６０
抑制骨髓瘤细胞的增殖并诱导凋亡…。本实验通过研培养液将对数生长期的Ｕ２６６细胞配制成５ｘ１０５个／
究ＡｓＯ联合抗坏血酸（ＡＡ）对骨髓瘤Ｕ２６６细胞增殖ｍＬ细胞悬液，每孑Ｌ２００Ｌ加入９６孔培养板内。分别
与凋亡的影响，以期为临床合理应用ＡｓＯ，治疗ＭＭ以不同的时间点和药物浓度作为一组，每组均设３个
找到一种低毒高效的联合治疗方案。复孑Ｌ及１个对照孑Ｌ．对照孑Ｌ加入空白对照孑Ｌ的细胞。
１材料与方法然后每孑Ｌ加入５ｍｇ／ｍＬＭＴＹ２０Ｌ，再培养４ｈ，离
１．细胞株１人ＭＭ细胞株Ｕ２６６引自苏州大学医心，弃上清，每孑Ｌ加２００Ｌ二甲亚砜，振摇至结晶溶
学院，培养基为ＲＰＭＩ一１６４０培养液（含１０％／Ｉｘ牛血解后用酶联仪测定吸光度Ａ值（测试波长６００ｎｍ）。
清、硫酸庆大霉素１００ＩＵ／ｍＬ、ｐＨ７．２），于３７℃，５％以该组复孑Ｌ的平均值作为该组细胞的Ａ值。细胞生
ＣＯ培养箱培养，取对数生长期细胞用于实验。长抑制率＝１一（Ａ实验／Ａ对照）×１００％。
１．２主要试剂及仪器ＲＰＭＩ一１４６０（Ｇｉｂｃｏ公司），四１．３．４细胞周期检测药物与Ｕ２６６细胞共同培养
甲基噻唑氮蓝（ＭＴＦ，华美生物工程公司），二甲亚砜４８ｈ．每组收集１×１０个细胞，７Ｏ％（体积分数）乙醇４℃
（Ｓｉｇｍａ公司）．新生小牛血清（杭州四季青生物材料有固定过夜，加入ＲＮＡ酶，３７℃水浴消化ｌ５～３０ｍｉｎ以
限公司）：Ａｎｎ
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