《微生物发酵技术》——项目五 发酵工业的种子制备.pptxVIP

发酵技术项目五发酵工业的种子制备

第一节：种子制备（一）种子制备的原理（二）优良种子应具备的条件（三）种子制备的步骤

一、种子制备的原理菌种一般采用“沙土管”、“冻干管”保藏，使其处于休眠状态，以防止其退化。在发酵使用前必须进行菌种的活化、扩大培养等技术环节，制备发酵工业的种子。

一、种子制备的原理种子液(几或几十立方米)按10%接种量发酵罐(几十或几百立方米)由实验室制备到车间生产的过程种子质量的优劣对发酵生产起关键作用。其生产方法与条件随不同的生产品种和菌种种类而异。

一、种子制备的原理种子制备又称为种子的扩大培养，是指将冷冻干燥管、沙土管中处于休眠状态的工业菌种接入试管斜面活化后，再经过摇瓶及种子罐逐级扩大培养而获得一定数量和质量纯种的过程。这种纯培养物称为种子。

二、优良种子应具备的条件1234菌种活力强接种量菌种生理状态稳定纯种发酵5生产能力稳定

三、种子制备的步骤种子制备的步骤大致可分为1.斜面活化2.实验室种子制备阶段3.生产车间种子制备阶段

三、种子制备的步骤1.斜面活化将沙土管或冷冻干燥管中的种子接种到斜面培养基中进行活化培养。

三、种子制备的步骤2.实验室种子制备将生长良好的斜面孢子或菌丝转种到扁瓶固体培养基或摇瓶液体培养基中进行扩大培养，完成实验室种子制备。实验室种子制备阶段包括琼脂斜面、固体培养基扩大培养或摇瓶液体培养。

三、种子制备的步骤3.生产车间种子制备01种子罐的作用：使孢子发芽，生长繁殖成菌（丝）体，接入发酵罐能迅速生长，达到一定的菌体量，以利于产物的合成。02种子罐的培养基：接近发酵罐培养的醪液成分和培养条件，使菌体适应发酵环境。

三、种子制备的步骤种子罐级数：制备种子需逐级扩大培养的次数。一级种子罐扩大培养二级种子罐扩大培养（发芽罐、繁殖罐）三级种子罐扩大培养：生长更慢的菌种一级发酵：在小型发酵罐(5~30L)中进行试验时，直接采用孢子或菌丝体接入罐中发酵。二级发酵三级发酵四级发酵

三、种子制备的步骤接种龄与接种量接种龄是指种子罐中培养的菌种转入下一级种子罐或发酵罐时的培养时间。

三、种子制备的步骤微生物的生长特性

三、种子制备的步骤接种量接种量是指移入的种子液体积和接种后培养液体积的比例。接种量的大小决定于生产菌种在发酵罐中生长繁殖的速度并且直接影响发酵周期，采用较大的接种量可以缩短发酵周期并可减少杂菌的生长机会。

严谨科学的种子制备过程是发酵安全生产的内在灵魂！

第二节：种子质量控制措施（一）影响种子质量的因素（二）种子质量控制措施（三）种子制备实例

一、影响种子质量的因素种子质量受很多因素影响，概括起来主要有以下几方面。主要有以下因素：原材料质量培养温度斜面湿度通气与搅拌培养基pH斜面培养时间及冷藏时间

一、种子制备的原理1.原材料质量原材料的产地、品种、加工方法及用量、琼脂的质量、水质的硬度、无机离子含量等都会影响孢子的质量。例如制备霉菌用的大（小）米，其产地、颗粒大小、均匀程度不同，孢子质量也不同。蛋白胨加工原料不同，如鱼胨或骨胨，对孢子质量影响也不同。

一、种子制备的原理2.培养温度温度对多数微生物的斜面孢子质量有显著影响。温度过低会导致菌种生长发育缓慢，温度过高会使菌丝过早自溶。

一、种子制备的原理3.斜面湿度湿度低，孢子生长快；湿度高，孢子生长慢。气候干燥条件下，孢子斜面长得较快，在含有少量水分的试管斜面培养基下部孢子长得较好，而斜面上部由于水分迅速蒸发呈干瘪状，孢子稀少。在湿度高的条件下，斜面孢子长得慢，主要是由于试管下部冷凝水多而不利于孢子的形成。

一、种子制备的原理4.通气与搅拌充足的通气量能保证菌种代谢正常，提高种子的质量。

一、种子制备的原理5.斜面培养时间及冷藏时间种子在斜面培养基上培养的时间不可过长。斜面孢子一般培养7~8天时就开始自溶。但是如果培养了5天后冷藏，20天未发现自溶。冷藏时间过长会使菌体的活力下降。在链霉素生产中，斜面孢子在6℃冷藏两个月后的发酵单位比冷藏一个月的降低18%，冷藏3个月后降低了35%。

一、种子制备的原理6.培养基合适的C/N；种子罐和发酵罐的培养基成分接近；培养基成分的最适宜配比。

一、种子制备的原理7.pH各种微生物都有自己生长和合成酶的最适pH。选择最适种子培养pH的原则是获得最大比生长速率和适当的菌量，以获得最高产量。此外，培养最后一级种子的培养基的pH应接近于发酵培养基的pH，以便种子能尽快适应新的环境。

二、种子质量控制措施为了提供质量合格的种子，需要在种子制备的每个环节做好质量控制：1.菌种本身稳定性检查；2.创设适宜的培养环境;3.菌种的纯度检查。

二、种子质量控制措施1.菌种本身稳定性检查菌种在保藏过程中或多或少都会出现变异，因此定期考察菌种的生产能力十分必要。测定其生产能力

二、种子质量控制措施2.创设适