香薷散总黄酮提取工艺及体外抑菌研究.docx

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摘要

目的：探索研究香薷散中总黄酮的最佳提取工艺以及黄酮类化合物的体外抑菌效果。方法：此次实验，首先进行单因素实验，通过对液料比、乙醇体积分数、提取时间、提取温度四个因素的考察，在所得到的单因素实验结果的基础上，进行4因素3水平的正交试验，经过实验数据的计算与处理，得出最优的提取工艺。然后再进行3次平行的验证实验，并运用方法学考察以验证实验结果的准确性。最后，经过实验数据的处理分析，综合分析得出：溶剂提取法提取香薷散总黄酮的实验中，最优的提取工艺条件为料液比1︰10、乙醇体积分数70%、提取时间1h、提取温度65℃，此时总黄酮提取率为4.33%，为本实验的最佳提取方案。最后，进行体外抑菌实验，体外抑菌的MIC90药方浓度是6.25mg/ml，浸膏提取率均值为9.17％，由此可看出该药方抑菌效果较好，为香薷散的开发利用提供重要依据，也为大肠杆菌耐药菌的抑菌药物的研发提供重要基础。

关键词：香薷散；总黄酮；工艺优化；体外抑菌

绪论

研究的背景和意义

香薷散，又名“香薷饮”，最初记载于宋代官方编撰的《太平惠民和剂局方》中，香薷散由香薷、厚朴和白扁豆按2：1：1的比例配伍而成。香薷散中香薷为君药，性味辛热，气味芳香，具有化解体内的湿气、去除暑气，从而达到去除寒热、发汗解表的作用。厚朴为该方剂的臣药，性味辛温，联合应用可增强香薷化湿解表的作用。白扁豆为佐使药，性微温味甘，不仅可辅佐香薷和厚朴发挥增强脾胃功能、化解体内湿气、和中消暑的作用，还可以清上焦之暑热。主治因为暑月饮食生冷，意外受凉，外感风寒以致内伤于湿导致邪气郁滞于肌表，阳气被阴邪遏制，湿气袭击脾胃，从而导致运化失常[1]。

通过查阅文献，不同的提取工艺对香薷散总黄酮的提取率影响较大[2]，为了提高抗菌效果，我们需要通过单因素试验和正交试验[3]对香薷总散黄酮的最佳提取方案进行确定。

目前学者研究香薷散药理作用的方面，对于其总黄酮提取及抗菌的研究尚有欠缺[4]。因此本文对香薷散总黄酮提工艺的优化及其体外抗菌进行了进一步探讨，希望为今后香薷散临床研究和开发出更多天然抗菌剂提供理论依据。

植物中天然抗菌剂研究进展

1.2.1天然抗菌剂的活性成分

黄酮类化合物

黄酮类化合物(flavonoids)具有较强的抗菌活性，其作为抗菌药物使用效果十分明显。随着对黄酮类化合物的研究日渐深入，已经发现其能从多种植物中分离而得。从很多文献中可知，黄酮类化合物具有清除自由基、降血压血脂、抗癌、抗菌、抗炎等作用[5]，而且作用十分明显。

生物碱类

生物碱是一类重要的天然产物，数量众多，结构种类复杂。在抗生素广泛应用的今天，细菌对抗生素的耐药性也日渐增强，故而对生物碱在抗菌方面的研究就变得尤为重要。随着学者们对生物化学和生物碱的深入研究，越来越多的具有抗菌活性的生物碱被发现，对人类在抑菌方面的研究有着重要的意义[6]，可推动生物碱在医药研究方面的发展。

多酚类

多酚类化合物分为黄酮类和非黄酮类，非黄酮类包括酚酸类、单宁类以及花色苷类等。多酚类化合物多存在于植物组织中，抗菌活性和抗氧化作用[7]都比较强。例如生姜[8]，姜属植物的块根茎，其中富含多酚类化合物，故除了具有解表散寒、化痰止咳、温中止呕的功效[9]之外，还具有较强的抗菌活性。白藜芦醇[10]属于多酚化合物，三羟基二苯乙烯类非黄酮类，研究表明其在抗菌、抗炎、抗癌、抗氧化等方面的作用明显[21]。

甾类化合物

甾类化合物(steroid)又称类固醇化合物，存在于植物体内的甾体皂苷类化合物[11]，基本结构为环戊烷稠多氢化菲，对心脏具有显著的生物活性。主要在百合科、龙舌兰科、玄参科等单子叶植物中，可提取到甾类化合物。甾体的抗菌活性具有良好的开发价值和前景[12,13]，可在人类的发展史上为人类的健康作出重要贡献。

其他物质

鱼腥草又叫作蕺菜，三白草科多年生的草本植物，是日常生活中常用的中草药之一[14]。鱼腥草的主要有效成分是鱼腥草素以及2-十一烷酮，其抗菌和抗病毒的作用较为安全、持久[15]。此外，部分醌类和多糖类化合物也是具有良好的抗菌活性。

1.2.2研究黄酮抗菌作用的目的和意义

众所周知，抗菌药物广泛应用于临床治疗各种感染性疾病[16]，目前而言，虽然临床上用来抗菌治疗的药物品种非常多，抗菌药物也在治疗危害人类健康的感染性疾病中发挥了重要的作用，但随着时代的发展，细菌和真菌对于抗菌药的耐药性也在逐年不断升高、传播与蔓延，容易引发多重耐药菌感染。因此，开发具有更强抗菌活性、不易产生耐药性的抗菌药物，为新药的研发及抗感染药物的临床应用提供新的研究方向和更多可能性变得极其重要。

1.3黄酮类化合物

黄酮类化合物的分类

黄酮类化合物以2-苯基色原酮