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DB13/Txxxx—2022

规模化奶牛场布鲁氏菌病净化技术规范

1范围

本标准规定了规模化奶牛场布鲁氏菌病的诊断、检测净化、生物安全等技术要求。

本标准适用于规模化奶牛场布鲁氏菌病的净化，其他类型的奶牛场布鲁氏菌病净化可参考执行。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB4143牛冷冻精液

GB7959粪便无害化卫生要求

GB16548病害动物和病害动物产品生物安全处理规程

GB16568奶牛场卫生规范

GB18596畜禽养殖业污染物排放标准

GB/T18646-2018动物布鲁氏菌病诊断技术

NY/T34奶牛饲养标准

NY/T1567标准化奶牛场建设规范

NY/T1952动物免疫接种技术规范

NY5030无公害食品畜禽饲养兽药使用准则

NY5045无公害食品生鲜牛乳

NY5047无公害食品奶牛饲养兽医防疫准则

NY/T5049无公害食品奶牛饲养管理准则

《畜禽标识与养殖档案管理办法》（2006年农业部令第67号）

《动物防疫条件审查办法》（2010年农业部令第7号）

《乳用动物健康标准》（2008年农业部公告第1137号）

《种用动物健康标准》（农业农村部）

《奶牛标准化规模养殖生产技术规范》（农办牧[2008]第3号）

《布鲁氏菌病防治技术规范》（农医发[2007]12号）

《动物疫病净化场评估技术规范》（疫控监函[2021]156号）

3术语和定义

下列术语和定义适用于本标准。

3.1规模化奶牛场

具有独立封闭的饲养管理区，成母牛存栏在100头以上，取得《动物防疫条件许可证》，管理规范的奶牛场。

3.2净化标准（非免疫）

连续2年以上无布鲁氏菌病临床病例，布鲁氏菌抗体检测阴性；具备维持净化状态的生物安全及管理条件。

3.3生物安全

为阻止动物病原体场外传入、场内传播和向场外扩散所需的一系列设施和措施。

4实验室检测方法

4.1血清学检测

4.1.1检测血清样品

虎红平板凝集试验（RBT），试管凝集试验（SAT），间接酶联免疫吸附试验（i-ELISA），竞争酶联免疫吸附试验（c-ELISA），补体结合试验（CFT）；见国标GB/T18646-2018。被检血清来自布鲁氏菌病非免

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疫奶牛或使用A19疫苗皮下注射超过18个月或使用S2疫苗口腔喷服接种超过6个月的奶牛。

4.1.2检测乳样

全乳环状试验（MRT），见国标GB/T18646-2018。被检乳样为新鲜全乳或混合乳，来自的奶牛同4.1.1，但不得为初乳、脱脂乳、煮沸过的乳、冻结乳、腐败乳、酸化乳、乳房炎及其他乳房疾病患病牛的乳样。

4.1.3免疫血清抗体与自然感染血清抗体鉴别检测琼脂凝胶免疫扩散试验（NH-GD），见附录A。

4.2病原学检测

4.2.1样品采集

流产胎儿可无菌采集胎衣、羊水、肝、脾、淋巴结、胃内容物等；流产母牛可无菌采集乳汁、阴道分泌物等。剖检采样过程应当防止病原微生物扩散，操作人员应当采取针对性防护措施。

4.2.2检测方法

聚合酶链式反应（PCR），见国标GB/T18646-2018。

5诊断

5.1病例诊断

对流产母牛、流产胎儿，采用4.2.2检测结果阳性的,判定为病例。

5.2感染判定

5.2.1对临床健康奶牛，采用RBT或i-ELISA、MRT中任一方法，检测结果阳性的判为疑似感染阳性。

5.2.2对临床健康奶牛，采用SAT、c-ELISA、CFT中任一方法检测结果阳性的，判为感染阳性。

5.2.3对免疫布鲁氏菌病疫苗未超过4.1.1接种时间的临床健康奶牛，采用4.1.3检测结果阳性的，判为感染阳性。

6检测净化

6.1感染状况调查

按照奶牛总存栏数、预期感染率3%、置信度95%确定抽样数量，并根据泌乳牛、干乳牛、后备牛存栏数量按比例分配，覆盖到每个栋舍随机抽样，同时兼顾不同奶牛品种。采用i-ELISA或RBT方法检测，掌握牛群布鲁氏菌病感染率。

6.2确定净化技术路线

6.2.1牛群布鲁氏菌病感染率2%，禁止或停止免疫。全群循环检测，隔离淘汰患病牛或感染阳性牛。

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