紫外—可见分光光度法.ppt

**第三节紫外-可见分光光度计棱镜有玻璃和石英两种材料。玻璃棱镜只能用于350~3200nm的波长范围，即只能用于可见光域内。石英棱镜可使用的波长范围较宽，可从185~4000nm，即可用于紫外、可见和近红外三个光域。光栅可用于紫外、可见及红外光域，而且在整个波长区具有良好的、几乎均匀一致的分辨能力。它具有色散波长范围宽、分辨本领高、成本低、便于保存和易于制备等优点。缺点是各级光谱会重叠而产生干扰。第31页,共39页，5月，星期六，2024年，5月**第三节紫外-可见分光光度计（三）吸收池吸收池用于盛放分析试样，一般有石英和玻璃材料两种。石英池适用于可见光区及紫外光区，玻璃吸收池只能用于可见光区。为减少光的损失，吸收池的光学面必须完全垂直于光束方向。在高精度的分析测定中，吸收池要挑选配对。因为吸收池材料的本身吸光特征以及吸收池的光程长度的精度等对分析结果都有影响。第32页,共39页，5月，星期六，2024年，5月**（四）检测器常用的检测器有光电池、光电管和光电倍增管等。硒光电池对光的敏感范围为300~800nm，其中又以500~600nm最为灵敏。这种光电池的特点是能产生可直接推动微安表或检流计的光电流，但由于容易出现疲劳效应而只能用于低档的分光光度计中。光电管在紫外-可见分光光度计上应用较为广泛。光电倍增管是检测微弱光最常用的光电元件。第33页,共39页，5月，星期六，2024年，5月**第三节紫外-可见分光光度计（五）信号指示系统它的作用是放大信号并以适当方式指示或记录下来。常用的信号指示装置有直读检流计、电位调节指零装置以及数字显示或自动记录装置等。很多型号的分光光度计装配有微处理机，一方面可对分光光度计进行操作控制，另一方面可进行数据处理。第34页,共39页，5月，星期六，2024年，5月**第三节紫外-可见分光光度计二、紫外-可见分光光度计的类型紫外-可见分光光度计的类型很多，但可归纳为三种类型，即单光束分光光度计、双光束分光光度计和双波长分光光度计。1，单光束分光光度计经单色器分光后的一束平行光，轮流通过参比溶液和样品溶液，以进行吸光度的测定。这种简易型分光光度计结构简单，操作方便，维修容易，适用于常规分析。第35页,共39页，5月，星期六，2024年，5月**第三节紫外-可见分光光度计2，双光束分光光度计经单色器分光后经反射镜分解为强度相等的两束光，一束通过参比池，一束通过样品池。光度计能自动比较两束光的强度，此比值即为试样的透射比，经对数变换将它转换成吸光度并作为波长的函数记录下来。双光束分光光度计一般都能自动记录吸收光谱曲线。由于两束光同时分别通过参比池和样品池，还能自动消除光源强度变化所引起的误差。第36页,共39页，5月，星期六，2024年，5月**第37页,共39页，5月，星期六，2024年，5月**第四节分析条件的选择一、测量条件的选择1.吸光度的范围：T∈20%~65%，A∈0.2～0.7之间（0.434）吸收最大的波长为入射光，干扰最小二、显色反应条件的选择显色反应：将试样组分转变成有较强吸收的有色化合物的反应。显色剂：与被测组分化合生成有色物质的试剂。1.显色反应的条件：(1)定量反应、选择性要好；干扰少。(2)灵敏度要高，摩尔吸光系数ε大。(3)有色化合物的组成要恒定，化学性质要稳定。(4)有色化合物与显色剂的最大吸收波长之差≥60nm。(5)显色反应的条件要易于控制。2.测定波长的选择：M十R＝MR

（被测物）（显色剂）（有色配合物）第38页,共39页，5月，星期六，2024年，5月*感谢大家观看第39页,共39页，5月，星期六，2024年，5月关于紫外—可见分光光度法**一、分子吸收光谱分析的发展概况可见-紫外-红外目视比色-光电比色-分光光度光声光谱-长光程吸收光谱-传感器第一节 概述第2页,共39页，5月，星期六，2024年，5月**二、分子吸收光谱的分类和特征紫外-可见 电子光谱 ?Ee=1-20eV红外 振动光谱 0.05-1远红外 转动光谱 0.005-0.05第3页,共39页，5月，星期六，2024年，5月*在分子中，除了电子相对于原子核的运动外，还