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第六章植物细胞工程制药;生物技术制药;生物技术制药;背景;;;;利用植物组织和细胞培养生产药用成分优点;培养周期短,有利于节约成本大规模生产。;4.与哺乳动物细胞培养系统相比,植物表达系统具有耗费极低而生产蛋白复合物量大的潜力。
5.而且植物表达系统不存在来自动物、细菌或者病毒病原体的污染问题。;6.1基本概念
6.2植物细胞工程发展简史
6.3植物细胞的形态及生理特性
6.4植物细胞培养的基本技术
6.5影响植物次级代谢产物累积的因素
6.6植物细胞培养的生物反应器
6.7进展与展望
;6.1基本概念
6.2植物细胞工程发展简史
6.3植物细胞的形态及生理特性
6.4植物细胞培养的基本技术(重点)
6.5影响植物次级代谢产物累积的因素(重点)
6.6植物细胞培养的生物反应器
6.7进展与展望(难点)
;学习目标
掌握:植物细胞培养的基本技术。
掌握:影响植物次级代谢产物累积的因素。
熟悉:常用植物细胞生物反应器的特征及应用。
熟悉:植物细胞制药中常用新技术。
了解:植物细胞工程发展简史。;6.1基本概念;(2)植物的分化:精细胞与卵细胞的结合;;;(6)植物组织或器官的无菌培养
;;;(13)次级代谢作用和次级代谢产物;次级代谢产物的特征:
有明显的分类学区域界限
生物合成需要在一定的条件下才能发生
缺乏明确的生理功能
是生命活动的多余成分;思考题;6.2植物细胞工程发展简史;1.?细胞是有机体,一切动植物都是由细胞发育而来,并由细胞和细胞产物所构成(不可描述成“一切生物都是由细胞和细胞产物构成”);
2.所有细胞在结构和组成上基本相似;
3.新细胞是由已存在的细胞分裂而来;
4.生物的疾病是因为其细胞机能失常;
5.细胞是生物体结构和功能的基本单位;
6.?生物体是通过细胞的活动来反映其功能的;
7.细胞是一个相对独立的单位,既有它自己的生命,又对与其他细胞共同组成的整体生命起作用。
;1902年,德国Haberlandt提出了细胞全能性学说,并进行了植物叶肉细胞、髓细胞、腺细胞、气孔保卫细胞、表皮细胞的培养试验,奠定了细胞工程的基础。;20世纪30年代胚胎培养和器官培养
50年代期间,组织培养进入新的阶段
;;6.3植物细胞的形态及生理特性;
6.3.1植物细胞的形态
;南瓜茎的筛管;;;;;;;6.3.3植物细胞的主要生理活性物质及其他化学组分;①酶类(enzyme):有机催化剂,生物体内所有的反应都是在酶的催化作用下进行的。;;;;①生物碱(alkaloide):有显著的生物活性,是中草药中重要的有效成分之一。
麻黄碱—存在于麻黄属植物中,治疗哮喘。
咖啡因—从茶叶、咖啡果中提炼,祛除疲劳、兴奋神经,临床上用于治疗神经衰弱和昏迷复苏。
;;;;;①延迟期:细胞数量不变,核酸及蛋白合成较快。
②加速期:细胞快速生长期,干重恒定,细胞数、DNA和蛋白质浓度增加,有丝分裂活性、RNA含量和蛋白质合成能力减少。;③对数期:介于最大生长率和蛋白质合成完全停止期之间。增加细胞鲜重、干重及RNA酶活性,蛋白质合成能力完全减退
④稳定期:细胞数稳定,细胞高液泡化,非常脆弱,高度分化,有机化合物的高浓度,积累次级代谢产物。;6.3小结(植物细胞的形态及生理特性);思考题;6.4植物细胞培养的基本技术;CompanyLogo;植物细胞培养的基本技术包括:
6.4.1植物材料的准备
6.4.2培养基制备
6.4.3培养方法选择;
植物组织的选择取决于工作目标,几乎植物的任何部分都能诱导而产生愈伤组织。;植物组织培养的外植体必须是无杂菌材料,培养前必须对外植体进行严格的灭菌处理。
用于植物组织培养的灭菌剂很多,表6-5。
选择表面灭菌剂的原则:
灭菌后易于除去或容易分解的试剂。;常用的灭菌剂有:次氯酸钙、次氯酸钠、氯化汞
次氯酸钙:适用于草本植物和柔软组织,5~30min,使用浓度9~10%。
氯化汞:灭菌效果最好,但去除也最困难,灭菌时间不宜过长。是休眠种子的理想灭菌剂,使用浓度为0.1%,2~10min。;;6.4.2培养基及其组成;;;;;;赤霉素:
刺激叶和芽的生长,加速细胞的伸长。
脱落酸:
引起芽休眠、叶子脱落和抑制生长。
乙烯:
使植物横向增长,促使果实成熟和花的枯萎。;;;;6
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