《生物技术制药》第四章抗体制药-3.1.pptx

抗体制药BiotechnologicalPharmaceutics抗体制药（一）

抗体制药

抗体制药知识导图抗体制药基因工程抗体抗体应用抗体概述抗体结构抗体功能抗体类型多克隆抗体单克隆抗体基因工程抗体小分子抗体嵌合与改型抗体双特异性抗体抗体融合蛋白胞内抗体人源化抗体预防诊断（体外）治疗治疗性单克隆抗体人源化抗体抗体偶联药物

抗体制药BiotechnologicalPharmaceutics本章目的要求1、掌握多、单克隆抗体的概念。2、了解制备单克隆抗体的一般流程。3、掌握基因工程抗体的类型。4、掌握抗体诊断试剂的分类。

抗体制药BiotechnologicalPharmaceutics4.1概述?1890年Behring和北里柴三郎发现白喉抗毒素,建立了血清疗法,开创了抗体制药。?1937年Tiselius用电泳法将血清蛋白分离为白蛋白、α、β、γ球蛋白，并证明抗体活性主要存在于γ球蛋白组分。?70年代中期，日本利根川进证实了Ig的基因结构，获得1987年的theNobelprize。

抗体制药BiotechnologicalPharmaceutics抗体？是指能与相应抗原特异性结合具有免疫功能的球蛋白。抗体的产生？机体免疫系统受抗原刺激后，B淋巴细胞被活化增殖和分化为浆细胞，由浆细胞合成和分泌的球蛋白。

抗体制药BiotechnologicalPharmaceutics20世纪60年代发现多发性骨髓瘤是浆细胞癌变形成的恶性增殖性疾病。病人血清中出现同抗体结构类似的球蛋白，统称为免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）。所以Ig是化学结构的概念，而抗体是生物学功能的概念。

BiotechnologicalPharmaceuticsIgG分子的结构高频突变区，也称互补决定区(CDR)，抗体多样性。骨架区(FR):序列相对恒定

重链（heavychain，H链）：5类：μ,γ,α,δ及ε链；由450-550个氨基酸组成，分子量50-75kDa，含糖数量不同，4-5个链内二硫键；对应的恒定区有5种亚型：IgM，IgG，IgA，IgD和IgE；在保持抗原特异性的情况下可相互转换。IgG类：4个亚类，拥有各自的生物学功能。BiotechnologicalPharmaceuticsIgG分子的结构

轻链（lightchain，L链）：由214个氨基酸残基组成，通常不含碳水化合物，分子量为25kDa，有两个由链内二硫键组成的环肽；L链：根据C区氨基酸组成与抗原特异性不同，L链分为κ与λ2个亚型；天然抗体分子的两条轻链类型相同；不同的H链与L链（κ或λ）组成完整的Ig分子。IgG分子的结构BiotechnologicalPharmaceutics

每条链含有一个-NH2的V区，一个或多个-COOH的C区（L链含1个：CL，H链含3-4个：γ,α,δ链含3个即CH1-CH3，μ及ε含4个即CH1-CH4）每个结构域有两个β-折叠片层通过一个二硫键连接。IgG分子的结构BiotechnologicalPharmaceutics

抗体制药BiotechnologicalPharmaceutics

免疫球蛋白基因的结构、重排与表达编码多肽链基因符号基因染色体定位人小鼠κ轻链λ轻链重链IgκIgλIgH2221461612BiotechnologicalPharmaceuticsH链及κ,λ轻链位于不同的染色体。H链由4种基因片段组成：V(variable),D(dinersity),J(joining),C(constant);L链:V(variable),J(joining),C(constant);

免疫球蛋白基因的结构、重排与表达BiotechnologicalPharmaceutics免疫球蛋白基因是由分开的多基因家族编码，V(D),J编码可变区；C编码恒定区。基因重排：在上述成簇的基因中选择某些基因片段重新组合得到完整功能性的Ig编码基因。

抗体的多样性抗原不是抗体多样性产生的根本原因：在抗原暴露之前，B细胞表面已经存在免疫球蛋白；细胞核内不存在大量不同的抗体基因结论：细胞只能利用有限的免疫球蛋白基因通过重组编码大量的免疫球蛋白。免疫球蛋白的多样性遇抗原前：主要源自B细胞系基因上V、D、J的大量存在及这些基因片段的重组；遇抗原后：B细胞经体细胞高频突变进一步扩大其多样性。BiotechnologicalPharmaceutics

抗体多样性表现1）H、L链的可变区V(D),J基因重排2）连接多样性3）H、L链的随