《生物技术制药》第四章抗体制药-3.2.pptx

抗体制药;Review;LimitationofMcAb;抗体制药;1）降低人体对异种Ab的排斥反应；

2）减少Ab的相对分子量，利于其穿透血管壁，达到病灶核心部位；

3）根据需要，制备新型Ab；

4）采用多种表达方式，大量表达Ab分子，降低生产成本。;抗体制药;定义：在一个完整的IgG分子结构基础上，去除某些非功能的或者非关键性的抗体片段，只保留对抗原抗体反应有重要意义的功能部分，通过这种方式得到的具有一定生物活性和功能的抗体片段。

特点：相对分子质量低；免疫原性低；易于清除;抗体制药;抗体制药;抗体制药;抗体制药;抗体制药;抗体制药;抗体制药;人源化抗体;BiotechnologicalPharmaceutics;改型抗体;表面重塑抗体

表面重塑抗体是指对异源抗体表面氨基酸残基进行人源化改造。

该方法的原则是仅替换与人抗体SAR差别明显的区域，在维持抗体活性并兼顾减少异源性基础上选用与人抗体表面残基相似的氨基酸替换；

另外，所替换的区段不应过多，对于影响侧链大小、电荷、疏水性，或可能形成氢键从而影响到抗体互补决定区（CDR）构象的残基尽量不替换。;去免疫化抗体

改造鼠单抗的人源化抗体依然有1-5%的鼠源成分，仍可能引起抗抗体反应。

从免疫源头出发，剔除或者改造能够在人体内引起免疫反应的成分，如去除对人T细胞的识别表位，从根源上阻断抗抗体反应。

;链替换抗体

Chainshufflingantibody；在定向选择技术指导下，利用抗体库展示技术，逐步将鼠源抗体的H、L链完全替换为人抗体序列，最终获得与亲本鼠源抗体结合同一表位的全人源抗体。

2005年，链替换技术成功制备Humira（修美乐,通用名:adalimumab,阿达木单抗）单抗，用于治疗慢性关节炎等免疫性疾病。

;BiotechnologicalPharmaceutics;双功能抗体是双特异性单链抗体（BisFvs），最早由Hollinger等1993年创造，是一种小分子的双价双特异性抗体片段。

;双功能抗体的制备方法

非共价键二聚体

共价连接双特异单链抗体

应用亮氨酸拉链、螺旋-转角-螺旋等蛋白质结构域将两单链抗体连接起来

;1.定义：scFv多聚体

2.特征

能高选择性、高亲和性地同靶抗原或肿瘤相关抗原结合

在血循环中，与效应细胞或细胞毒触发分子有较低亲和力

应为人源化抗体，最大限度地减少人抗鼠蛋白的排斥反应，使重复给药不受限制

分子应大小适中，既能渗透到肿瘤组织内部，又能保证适当的滞留时间。;BiotechnologicalPharmaceutics;1、属于双功能抗体范畴

抗体的一部分被非抗体序列替代，所形成的融合蛋白具有新的特性,称之为抗体融合蛋白。

2、种类根据构建方式，抗体融合蛋白主要分两种形式：

Fc融合蛋白

（Fcfusionprotein,FcFP）

抗原结合融合蛋白

（antigen-Bindingfusionprotein,ABFP）;3.构建抗体融合蛋白的基本原则和关键问题

基本原则：

将第一个蛋白的终止密码子删除，再接上带有终止密码子的第二个蛋白基因，可实现两个基因共表达

关键问题：

两个蛋白间的接头序列连接肽

3-5个氨基酸就可正确折叠

疏水性和一定伸展性得较长多肽可缓解蛋白间的干扰。;Intracellularantibody，intrabody。一项全新的可阻断细胞内重要靶蛋白的胞内抗体技术。

定义：在非淋巴细胞内表达并被定位于亚细胞区室，特异性干扰或阻断靶分子内的活性或加工、分泌过程，从而发挥其生物学功能的一类新型工程抗体。

应用

肿瘤细胞特定的亚细胞器表达用于肿瘤治疗

艾滋病的基因治疗

中枢神经系统疾病、移植排斥、自身免疫疾病;2024/12/2;2024/12/2;2、肿瘤治疗:

单抗药物抗肿瘤能有效地降低传统肿瘤药物治疗的不良反应。;BiotechnologicalPharmaceutics;2024/12/2;4、自身免疫性疾病:

抗体对类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、牛皮癣、多发性硬化、硬皮病、溃疡性结肠炎等疗效较好。;5、抗病毒感染：

近年来研究表明，在HBV、HCV、HIV等病毒感染性疾病中，人源化抗体显示了较好的应用前景。;BiotechnologicalPharmaceutics;1、小分子抗体（Fab、Fv或ScFv、单域抗体及最小识别单位）

2、嵌合抗体和人源化抗体

3、双功能及多功能抗体