医学机能学实验：生理学实验PPT教学课件.pptx

医学机能学实验;;;;神经干动作电位;【实验目的】

1.学习坐骨神经干标本制备的基本操作技术。

2.掌握离体神经干动作电位的细胞外记录法。

3.观察刺激强度对神经干动作电位的影响。

4.掌握神经干动作电位传导速度及其不应期的测定方法。

【实验原理】

神经纤维的动作电位是神经兴奋的客观标志；神经干由很多兴奋性不同的神经纤维组成。神经干动作电位是由许多兴奋性不同的单根神经纤维的动作电位综合成的复合性电位变化。因此，不同于单根神经纤维的动作电位，神经干动作电位的电位幅度在一定范围内可随刺激强度的增加而加大。

兴奋部位的膜外电位负于静息部位；当神经冲动通过后，该部位的膜外电位又恢复到静息水平。神经干兴奋过程所发生的这种膜电位变化称为神经干动作电位。如果两个引导电极置于正常完整的神经干表面，当神经干一端兴奋后，兴奋波先后通过两个引导电极处，可记录到两个方向相反的电位偏转波形，称为双相动作电位。如果两个引导电极之间的神经组织有损伤，兴奋波只通过第一个引导电极，不能传导至第二个引导电极，则只能记录到一个方向的电位偏转波形，称为单相动作电位。;动作电位在神经纤维上的传导有一定的速度。不同类型的神经纤维，其传导速度各不相同，取决于神经纤维的直径、有无髓鞘、环境温度等因素。蛙类坐骨神经干中以Aa类纤维为主，传导速度为35～40m/s。测定神经冲动在神经干上传导的距离（d）与通过这一距离所需的时间（t），即可根据v＝d/t求出神经冲动的传导速度（v）。

可兴奋组织在接受一次刺激而兴奋后，其兴奋性会发生规律性的时相变化，依次经过绝对不应期、相对不应期、超常期和低常期，然后再恢复到正常的兴奋性水平。为了测定神经一次兴奋之后兴奋性的变化，可先给神经施加一个条件性刺激，引起神经兴奋，然后在此兴奋过程的不同时相再给予一个检验性刺激，检查神经对检验性刺激的反应以及所引起的动作电位的幅度，来判定神经组织的兴奋性的变化。

【实验动物】牛蛙

【实验材料】

蛙类手术器械、培养皿、滴管、任氏液（RingersSolution）、神经标本盒、BL-420N生物机能??验系统、刺激电极、引导电极、2%普鲁卡因溶液、1mL注射器。

;【实验步骤】

一、制备牛蛙坐骨神经干标本

1.破坏牛蛙脑脊髓：取牛蛙一只，用自来水冲洗干净。左手握蛙，用食指下压头部前端，拇指按压背部，使头前俯。中指与无名指夹其前肢，无名指与小指夹其后肢，使整个躯干做最大屈曲。把探针自枕骨大孔处垂直刺入，到达椎管，立即将探针改变方向刺入颅腔，向各侧不断搅动，彻底捣毁脑组织；再将探针原路退出，刺向尾侧，捻动探针使其逐渐刺入整个椎管内，彻底捣毁脊髓。脑脊髓破坏完全的标志是下颌呼吸运动消失，反射消失，四肢松软。

2.剪除躯干上部和内脏，去皮，制备下肢标本：用粗剪刀在骶髂关节前1cm处剪断脊柱，握住牛蛙下肢，沿躯干两侧（避开坐骨神经）剪开腹壁。此时躯干上部及内脏即全部下垂。剪除全部躯干及内脏组织。剪去肛周皮肤；用圆头镊子夹住脊柱，注意不要碰到坐骨神经，捏住皮肤边缘，逐步向下牵拉剥离皮肤。将全部皮肤剥除后，把标本置于盛有任氏液的培养皿中。

3.洗净双手和用过的全部手术器械。

4.分离两下肢：避开坐骨神经，用粗剪刀从背侧剪去骶骨，然后沿中线将脊柱剪成左、右两半，再从耻骨联合中央剪开，将已分离的标本浸入盛有任氏液的培养皿中。

5.坐骨神经干标本制备：取出一下肢，用蛙钉固定于蛙板上，固定时要注意，坐骨神经和腓肠肌朝上。先用玻璃分针沿脊柱侧游离坐骨神经腹腔部，然后循股二头肌和半膜肌之间的坐骨神经沟，纵向分离暴露坐骨神经之大腿部分直至腘窝，下沿腓总神经面直分离至踝关节附近为止。在分离过程中，把神经周围的结缔组织去除干净，并把神经的细小分支剪断，但要注意不要用金属器械碰触神经，也不要对神经过度牵拉。实验期间应不断滴加任氏液使神经保持湿润。在游离出的神经两端各系一线，然后剪断。将制备出的神经标本放置于盛有任氏液的培养皿中备用。将另一下肢的坐骨神经也依此法分离出来。

;二、仪器连接与参数设置

1.将动作电位标本盒的两个引导电极分别与外置BL-420N硬件设备CH1、CH2相连，刺激电极与刺激输出连接，另一端插入动作电位标本盒相应的电极插孔。

2.打开电路及BL-420N外置设备，双击桌面“BL-420N”图标，进入生物机能实验系统主界面。

3.选择实验项目“肌肉神经实验”，点击下拉菜单“神经干动作电位引导”，观察双相动作电位特性。

4.设置刺激强度为“0”，方式为“自动幅度”，方向为“增大”，增量为“0.02”，周期为“1”，是否程控选“是”。

5.选择同上，点击下拉菜单“神经兴奋传导速度测定”，电极距离2cm确定。点击右键选比较显示，合并图形，拉开反演线，点击菜单测量尺。根据两个动作电位的时间间隔，计算传导速度。

6.选择