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核酸的发现与研究简史
;核酸(nucleicacid);1868年瑞士的Miescher医生从脓细胞中提取核素(核酸的发现)
1944年Avery用肺炎球菌转化试验等证实DNA是遗传物质(核酸功能的认识)
;1953年Watson和Crick提出DNA的双螺旋结构模型(现代分子生物学的基础)
1968年Nirenberg发现遗传密码
1973年美国斯坦福大学首次进行了体外基因重组
1975年Temin和Baltimore发现逆转录酶
;1981年Gilbert和Sanger建立DNA测序方法
1985年Mullis发明PCR技术
1990年美国启动人类基因组计划(HGP)
1994年中国人类基因组计划启动
2003年完成人类基因组计划——约3~4万个基因
20世纪末发现许多具有特殊功能的RNA;核酸的分类、分布与功能;;其中,RNA根据其结构与功能不同,分为3类:
信使RNA(messengerRNA,mRNA):约占5%,蛋白质合成的直接模板
转运RNA(transferRNA,tRNA):约占15%,活化与转运氨基酸,识别密码
核蛋白体RNA(ribosomalRNA,rRNA):约占80%,充当装配机,提供场所
;核酸的分布区域特点:;核酸的分子组成;RNA含磷8.5%-9%
DNA含磷9%-10%;;;(一)戊糖是核苷酸组分之一;类别;嘌呤碱:A(adenine)、G(guanine)
嘧啶碱:C(cytosine)、T(thymine)、
U(uracil)
稀有碱基:甲基化衍生物
;碱基中含共轭双键,对260nm左右的紫外光有较强的吸收,可用于定性定量分析。;腺苷(AR)脱氧胞苷(dCR);三、碱基与戊糖相连形成核苷,核苷与磷酸连接形成核苷酸;游离存在的多为5’-核苷酸;;DNA的空间结构与功能
;DNA的空间结构与功能;1.DNA的二级结构——双螺旋结构模型;对DNA双螺旋结构模型作出贡献的科学家;ErwinChargaff(1905-2002)
Chargaff研究发现了DNA碱基的配对规律,也就是A必须与T配对,G和C配对。——Nature,2003;罗萨琳.富兰克林;目前已知DNA双螺旋结构可分为A、B、C、D及Z型等数种,除Z型为左手双螺旋外,其余均为右手双螺旋。;B型双螺旋DNA的结构特征;1.为右手反平行双螺旋
2.磷酸和脱氧核糖位于螺旋外侧,碱基位于内侧
3.螺距为3.4nm,直径为2nm
碱基平面与螺旋纵轴垂直
4.两条链间存在碱基互补:A与T或G与C配对形成氢键,称为碱基互补原则
5.螺旋的??定因素为氢键和碱基堆砌力
;共价封闭的环状双螺旋;2nmdiameterDNAduplex;核酸的基本结构——
一级结构;3?,5?-磷酸二酯键;3,5-磷酸二酯键;多核苷酸链:;;5′;
RNA一级结构指核苷酸排列顺序。
单链
发卡结构;RNA的空间结构与功能
;RNA的结构与功能;信使RNA(messengerRNA,mRNA)是合成蛋白质的模板。
不均一核RNA(hnRNA)含有内含子(intron)和外显子(exon)。
外显子是氨基酸的编码序列,而内含子是非编码序列。
hnRNA经过剪切后成为成熟的mRNA。;;从AUG开始,每三个核苷酸为一组编码了一个氨基酸,称为三联体密码(codon)。
成熟的mRNA由氨基酸编码区和非编码区构成。
5?-末端的帽子(cap)结构和3?-末端的多聚A尾(poly-Atail)结构。;帽子结构:m7GpppNm;;真核生物的mRNA的3’-末端转录后加上一段长短不一的聚腺苷酸。;;mRNA核内向胞质的转位
mRNA的稳定性维系
翻译起始的调控;(2)mRNA依照自身的碱基顺序指导蛋白质氨基酸顺序的合成;(4)mRNA的成熟过程是hnRNA的剪接过程;转运RNA(transferRNA,tRNA)在蛋白质合成过程中作为各种氨基酸的载体,将氨基酸转呈给mRNA。
由74~95核苷酸组成;
占细胞总RNA的15%;
具有很好的稳定性。;;tRNA具有局部的茎环(stem-loop)结构或发卡(hairpin)结构。;tRNA二级结构类似上面的三叶草结构;tRNA1.二级结构为三叶草型
2.三级结构为倒L
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