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凝血因子VIII活性(FVIII:C)测定.pdfVIP

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操作规程

出凝血10.1凝血因子VIII活性(FVIII:C)测定(第四版)

出凝血10.2原理:

凝血因子VIII活性是通过其纠正乏VIII因子血浆所致的凝固时间

延长的能力而测得的。将稀释已知凝血因子VIII活性的血浆与乏VIII

因子血浆的混合物做部分凝血活酶时间(APTT)测定,建立参考曲线,

该曲线能将受检者血浆的APTT值转化为VIII因子活性单位。受检者

血浆与乏VIII因子的基质血浆混合,测其APTT值,将受检者血浆的

测定结果在标准曲线上计算其凝血因子VIII的活性。

出凝血10.3标本处理:

患者处于休息状态下,采空腹静脉血(急诊病人除外)。采血者应

技术熟练,“一针见血”,以防止组织损伤,使外源性凝血因子进入标

本。最好不与其它实验一起采集而使血液停留在针管的时间延长。采

完血后,将血液沿管壁缓缓注入试管,避免产生气泡;然后迅速将血

液和抗凝剂轻轻颠倒混匀,避免用力震荡。

全血要在1小时内分离血浆。分离乏血小板血浆时,要在室温下

3000rpm离心10分钟,室温下可存放4小时。全部试验不能在4小时

内完成,应将乏血小板血浆分装在0.5~1.0ml的小试管中快速冷冻,

储存于-20℃冰箱中。冷冻过的标本不能再次冷冻,否则结果会不准确。

冷冻血浆融化时,应将盛冷冻血浆的容器置于37℃水浴中,并轻轻摇

动,使其迅速融化。

标本在-20℃可保存2周。-70℃可保存6个月。

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操作规程

出凝血10.4试剂:试剂购于天津威士达公司

1)APTT试剂:德灵Actin试剂(试剂盒代号527165)。每瓶试

剂内含磷脂(从兔脑中提取),1.0×104mol/L糅花酸,稳定剂;

共2ml。

2)乏VIII因子血浆(德灵,产品号OTXW)

3)0.025mol/L氯化钙

每瓶乏VIII因子血浆用蒸馏水1ml复溶。室温平衡15min后上机分析。

复溶的乏VIII因子血浆分装为0.1ml/支,-70℃可保存60天。实验前

应37℃快速解冻,轻轻颠倒混匀备用。

出凝血10.5仪器:使用Sysmex公司的CA-7000型全自动血液凝固仪。

出凝血10.6操作:按仪器操作步骤执行标准操作。

出凝血10.6.1开机:按下机器侧面的POWER按钮。开机后机器进行

自检,当屏幕上边显示“Ready:”时可以进行试验。

出凝血10.6.2检查消耗品:

1、准备反应杯:打开仪器上盖装反应杯的盖子查看反应杯是否够量,

不足时,需及时添加。(一次性最多可放1000个杯子)

2、准备试剂:按照仪器对试剂的要求,把试剂准备好,放到仪器内相

应位置,注意查看试剂的量和有效期。如还不熟悉试剂位置时,可在

主屏幕上选ReagentSetting,按屏幕显示放置试剂。

3、查看仪器的洗液瓶和废液瓶

出凝血10.6.3准备标本:将样本放入样本架,再将样本架放到仪器

进样器上。

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操作规程

出凝血10.6.4输入检测项目:主菜单上按下WorkList键,进入工

作菜单,输入VIII项目。

出凝血10.6.5输入样本号:按屏幕下菜单的IDNo.键,按顺序输

入样本的序号。

出凝血10.6.6开始检测:录入完所有测试信息,按下屏幕右上角

START键,开始检测。

出凝血10.7计算:仪器自动计算出结果。

出凝血10.8参考值:FVIII:C50~150%(或0.5~1.5)

出凝血10.9临床意义

凝血因子VIII水平增高:见于高凝状态和血栓性疾病,尤其是静

脉血栓形成性疾病,如DVT、肺栓塞、肾病综合征、口服避孕药、妊

娠高血压综合征、恶性肿瘤、肝病等。

凝血因子VIII水平降低:见于血友病甲,按其减

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