广粪蚊可培养共生菌多样性及其代谢产物应用研究.pdf

摘要

广粪蚊(CobolidiafuscipesMeigen)是一种分布广泛的食用菌害虫，可对食用菌

种植产业造成巨大损失。而昆虫共生菌不仅对宿主具有多种积极影响，还具有开

发新型微生物源农药的潜力。本研究采用传统培养法筛选菇房采集广粪蚊的可培

Y-(GC-MS)

养共生菌，并通过型嗅觉仪测试及气相色谱质谱联用仪分析确定可引

起广粪蚊成虫嗅觉行为的共生菌挥发性代谢产物成分，取得的主要研究结果如下：

本研究通过传统培养法从菇房采集的各龄期广粪蚊中筛选出73株可培养共生

菌，鉴定发现35种共生菌，隶属于4门11科16属，分别为变形菌门(Proteobacteria)、

厚壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Enterobacteriales)及放线菌门(Actinobacteria)；其中，

优势菌科为芽孢杆菌科(Bacillaceae)、肠杆菌科(Enterobacteriaceae)及微杆菌科

(Microbacteriaceae)；优势菌属为赖氨酸芽孢杆菌属(Lysinibacillus)，其它依次为芽

孢杆菌属(Bacillus)、变形杆菌属(Proteus)、微杆菌属(Microbacterium)和普罗维斯登

菌属(Providencia)。

本研究通过Y型嗅觉仪测试广粪蚊成虫在10、20及30分钟时，对来自本研究

筛选及课题组内保藏的不同生境广粪蚊的共26属50种共生菌发酵液的嗅觉行为反应，

发现水生产碱菌(Alcaligenesaquatilis)、柠檬酸杆菌(Citrobactersp.)、肠杆菌

(Enterobactersp.)、戈登氏菌(Gordoniasp.)、蜡状芽孢杆菌(Bacilluscereus)、雷氏普

罗维斯登菌(Providenciarettgeri)、普罗维斯登菌(Providenciasp.)、格陵兰变色杆菌

(Paenochrobactrumglaciei)(Leucobactersp.)(Myroidessp.)10

、亮杆菌及芳香菌等种

共生菌的发酵液对宿主成虫的引诱率显著高于对照组，沙福芽孢杆菌(Bacillus

safensis)GC-MS

的发酵液对宿主成虫的引诱率显著低于对照组。分析引起宿主显著

嗅觉行为的共生菌发酵液发现，水生产碱菌、柠檬酸杆菌未定种及格陵兰变色杆菌

的挥发性代谢产物中含量较高的物质则是醛类、酯类及含氮化合物，同样对广粪

蚊成虫具有引诱作用的肠杆菌未定种、戈登氏菌未定种、蜡状芽孢杆菌、雷氏普罗

维斯登菌、普罗维斯登菌未定种、亮杆菌未定种及芳香菌未定种等共生菌的挥发性

I

代谢产物中含有相对含量较高的有机酸与含氮化合物；而对广粪蚊成虫具有趋避

作用的沙福芽孢杆菌挥发性代谢产物中含有较高的酯类。

本研究探究了广粪蚊可培养内共生菌的组成，证实了不同生境广粪蚊的可培

养共生菌多样性存在差异。此外，本研究研究了广粪蚊成虫对其共生菌发酵液的

嗅觉行为，并通过GC-MS分析查明了使宿主产生显著嗅觉行为的共生菌挥发性代

谢物成分，为广粪蚊共生菌资源以开发新型绿色农药提供了相关的理论依据。

关键词：广粪蚊，可培养共生菌，嗅觉行为反应，Y型嗅觉仪，挥发物成分分析

II

Studyonthediversityofculturablecommensalbacteriaandthe

applicationoftheirmetabolitesinCobolidiafuscipes

Abstract

TheCobolidiafuscipesMeigenisawidelydistribu