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实验六体外抑菌实验ppt课件.pptxVIP

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动物机能学实验2;实验内容;实验六、抗菌药物的体外抑菌实验;耐药性;【基本原理】

抗菌活性:是指抗菌药抑制或杀灭病原微生物的能力。

两种测定方法:体外与体内(化学治疗实验);

评价指标:

(1)最低抑菌浓度(MIC):

能够抑制培养基中细菌生长的最低浓度。

(2)最低杀菌浓度(MBC):

能够杀灭培养基中细菌的最低浓度。;【试剂与器材】

细菌菌液(如金黄色葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌、沙门氏杆菌)、药液(青霉素、链霉素、磺胺嘧啶钠、四环素)、碘酒、牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、氢氧化钠、高压灭菌器、小试管、试管架、吸管、平皿等。

256μ/ml青霉素溶液:

药敏试纸的准备:

;下一张;下一张;细菌;二、试管二倍稀释法

取灭菌小试管10支,按照1至10编号,排列于试管架上。按照无菌操作,从第一管到第10管,分别加入牛肉膏汤1ml。用吸管吸取256μ/ml的青霉素溶液1ml放入第一管,并反复吹匀;接着从第一管吸出1ml放入第二管同样吹匀后吸出1ml放入第三管,依次逐管进行稀释到第8管,第10管不加青霉素液,作细菌对照组,第9管只加药物,不加菌液,作为药物对照组。

;;1-8,10各加入培养18h并用牛肉膏汤稀释至5×107~108cfu/ml的金黄色葡萄球菌菌液0.5ml。放入37℃培养箱内培养24h后,取出观察细菌生长情况。

以能抑制细菌生长的最小浓度为青霉素对该细菌的最低抑制浓度(MIC)。

最低杀菌浓度(MBC)

结果记录于下表:;管号;【注意事项】

1.接种细菌时要在无菌条件下均匀涂抹;用过的棉签火焰烧灼后丢弃。

2.用试管二倍稀释法测MIC值,稀释时注意

稀释的顺序;每次移液前注意清洗吸管。

3.药敏片之间要间隔适当距离,以免抑菌圈

出现交叉。

4.四人一组,纸片法每人一个平皿,作四种药物对一种菌的作用,同组每人所接菌种不同,平皿上做好记号。结果记录时将本组结果综合。

;【思考题】

分别以抑菌圈的大小和MIC值来比较常见药物对金黄色葡萄球菌的作用强度。;

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