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[命题最前沿十二]基因编辑技术及其应用;CRISPR/Cas9基因编辑技术能对基因进行定点编辑,其原理是由一条单链向导RNA(sgRNA)引导内切核酸酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割(如图)。
CRISPR复合体中的sgRNA的主要功能是与靶向基因(目的基因)上特定碱基序列互补,从而定向引导Cas9蛋白与靶向基因结合,并在特定位点切割DNA。;CRISPR/Cas9基因编辑技术培育转基因生物,与传统的基因工程相比,其明显优点是可将目的基因定点插入所需位点,避免了因目的基因随机插入宿主细胞DNA引起的生物安全性问题。CRISPR/Cas9基因编辑技术在基因治疗、基因水平进行动植物的育种、研究基因的功能等方面有广阔的应用前景。;1.研究发现,向导RNA能识别特殊的DNA序列,然后引导Cas9蛋白对DNA双链进行切割。据下图分析,下列叙述正确的是()
A.向导RNA和双链DNA含有的含氮碱基不完全相同
B.虚线框内的核苷酸序列彻底水解的产物是8种核苷酸
C.Cas9蛋白不具有降低化学反应活化能的作用
D.合成Cas9蛋白的细胞结构含有磷脂分子和核酸
;解析:RNA含有的4种含氮碱基是A、U、G、C,DNA含有的4种含氮碱基是A、T、G、C,A项正确;虚线框内的核苷酸序列彻底水解的产物是磷酸、核糖、脱氧核糖和5种含氮碱基,B项错误;Cas9蛋白能对DNA进行切割,说明Cas9蛋白是一种酶,而酶具有降低化学反应活化能的作用,C项错误;合成Cas9蛋白的细胞结构是核糖体,核糖体含有rRNA,但核糖体没有膜结构,不含磷脂分子,D项错误。;2.猪瘟病毒能与猪细胞膜上的LamR受体蛋白结合,进而侵入细胞引起猪瘟。利用基因编辑技术改变LamR受体蛋白基因,使LamR受体蛋白不能与猪瘟病毒正常结合,但不影响生理功能,从而培育出抗猪瘟病毒猪。基因编辑原理是由一条人为设计的单链向导RNA(sgRNA)引导Cas9蛋白到特定的DNA位点进行切割,从而完成对目的基因的编辑。基因编辑过程如图所示。下列叙述错误的是();A.培育抗猪瘟病毒猪,一般选择受精卵作为基因编辑的受体细胞,这样获得的个体的所有细胞都无法被猪瘟病毒感染
B.Cas9蛋白的功能是准确识别DNA特定序列并进行切割
C.改造后的受体细胞经培养发育到囊胚或桑葚胚时,??将其进行冷冻保存或胚胎移植
D.通过基因编辑技术改造前后的两种LamR基因是等位基因;解析:培育抗猪瘟病毒猪,一般选择受精卵作为基因编辑的受体细胞,改造后的受精卵开始进行胚胎发育,这样获得的个体的所有细胞都无法被猪瘟病毒感染,A正确;根据基因编辑的原理和题图所示过程,单链向导RNA是通过碱基互补配对原则准确地识别并结合到DNA的特定位点,从而引导Cas9蛋白到达准确位置进行DNA的切割,B错误;改造后的受体细胞经培养发育到囊胚或桑葚胚时,可将其进行胚胎移植或冷冻保存,C正确;通过基因编辑技术改造后的LamR基因与改造前的基因位置相同,控制的性状不同,二者是等位基因,D正确。;3.中国科学院遗传与发育生物学研究所李传友团队提出了一种利用多重基因编辑技术以红果番茄(双子叶植物)为材料,快速定向创制七种不同果色番茄材料的策略。该研究利用多重基因编辑系统靶向敲除了红果番茄中控制三类色素合成或代谢的关键基因。下图是科研人员用CRISPR/Cas9基因编辑技术定点敲除目标基因的示意图,请回答下列问题:;(1)CRISPR/Cas9系统能精准识别相关基因,依据的原理是____________________________________发生碱基互补配对;Cas9蛋白能使目标DNA中的______________(填化学键名称)断裂,从而实现对______________(填“DNA单链”“DNA双链”“RNA单链”或“RNA双链”)的剪切。若要插入其他基因,可以利用____________酶将它们连接起来。;(2)研究人员将编辑好的基因导入番茄的体细胞,常用的方法是______________。该方法的优点是可以使目的基因进入植物细胞,并_______________________________________,使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。
(3)含有编辑好的基因的番茄体细胞具有全能性,在一定的营养和激素等条件下,可以经过____________的过程形成愈伤组织。当培养基中的____________________________时,主要诱导根的形成。;(4)五彩缤纷的水果和蔬菜不仅给人以美的视觉享受,还能提高消费者的购买欲。在培育彩色番茄的同时我们还需要考虑该策略对番茄的________________________________(答出2点即可)等性状的影响。;4.CRISPR/Cas9是一种高效的基因
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