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第二节 基因突变及菌种选育课件.ppt

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*8-遗传变异23、转化的类型(1)自然遗传转化自然感受态的出现是细胞一定生长阶段的生理特性,受细菌自身的基因控制。是自然界基因交换的重要方式。(2)人工转化人工感受态则是通过人为诱导的方法,使细胞具有摄取DNA的能力,或人为地将DNA导入细胞内。(3)原生质体转化*8-遗传变异2特殊的转化——转染(transfection)提取噬菌体或病毒的DNA/RNA来转化感受态的受体菌,并产生正常子代病毒或噬菌体。(区别于真核生物的转染)*8-遗传变异2二、接合(conjugation)通过供体菌与受体菌细胞之间的直接接触,遗传物质自供体菌转移入受体菌(原核微生物遗传物质转移方式,较广泛)。范围:革兰氏阴性菌中几乎所有的肠道菌科的细菌,革兰氏阳性菌中的链球菌、枯草杆菌、葡萄球菌、厌氧菌以及链霉菌等。*8-遗传变异2“U”型管实验(BernardDavis,1950)证实接合过程需要细胞间的直接接触U形管中间的滤板,允许培养基的营养物质通过,但细菌无法通过。*8-遗传变异2F因子(F质粒/致育因子)1、性状—含F质粒菌株,有1-4根性菌毛;2、特点—F因子可游离于细胞内,也可插入或整合到染色体上(附加体);3、F因子的分子量通常为5×107,上面有编码细菌产生性菌毛(sexpili)及控制接合过程进行的20多个基因。*8-遗传变异2*8-遗传变异24、F因子的四种细胞形式根据细胞中是否存在F因子以及其存在方式的不同,把E.coli分成四种菌株。①F-菌株:不含F因子,没有性菌毛,但可以通过接合作用接收F因子而变成雄性菌株(F+);②F+菌株:F因子独立存在,细胞表面有性菌毛。③Hfr(高频重组)菌株:F因子插入到染色体DNA上,细胞表面有性菌毛。④F’菌株:Hfr菌株内的F因子因不正常切割而脱离染色体时,形成游离的但携带一小段染色体基因的F因子,称为F′因子。细胞表面同样有性菌毛。*8-遗传变异2F-、F+、Hfr、F′菌株之间的关系*8-遗传变异2(1)F+×F-杂交杂交的结果:供体细胞和受体细胞均成为F+细胞,即:F+×F-=F++F+F+菌株的F因子向F-细胞转移,但含F因子的宿主细胞的染色体DNA一般不被转移。5、接合机制*8-遗传变异2*8-遗传变异2Hfr菌株的F因子插入到染色体DNA上,因此只要发生接合转移过程,就可以把部分甚至全部细菌染色体传递给F-细胞并发生重组,由此而得名为高频重组菌株。Hfr+F-→Hfr+(F-)(2)Hfr×F-杂交*8-遗传变异23、环出效应DNA102345678911023456789110‘2‘8‘9‘1‘10‘2‘3‘4‘5‘6‘7‘8‘9‘1‘序列3和序列7配对成环*8-遗传变异2*8-遗传变异2碱基结构的变化*8-遗传变异2(二)诱发变异的机制1、化学诱变剂引起的突变(1)碱基对直接置换(即一对碱基被另一对碱基所置换,分为转换和颠换。)如:常用的亚硝酸、羟胺和各种烷化剂(硫酸二乙酯,甲基磺酸乙酯,N-甲基-N’硝基-N-亚硝基胍,N-甲基-N-亚硝基脲,乙烯亚胺,环氧乙酸,氮芥等)。亚硝酸的诱变机制,使碱基发生氧化脱氨,腺嘌呤A变成次黄嘌呤H,胞嘧啶C变成尿嘧啶U。能引起颠换的诱变剂很少,只是部分烷化剂才有。*8-遗传变异2*8-遗传变异2①腺嘌呤经氧化脱氨后变成烯醇式次黄嘌呤(He),He通过互变异构效应形成酮式次黄嘌呤(HK)。②DNA双链第一次复制,结果Hk在6位上含有酮基,故只能与6位上含有氨基的胞嘧啶C配对。③DNA双链第二次复制,其中胞嘧啶(C)正常与鸟嘌呤(G)配对,使A-T→G-C,从而实现转换。④当胞嘧啶被氧化成尿嘧啶(U)时,也可实现G-C→A-T。*8-遗传变异2ATGC*8-遗传变异2GCAT*8-遗传变异2碱基置换在编码蛋白的基因中的可能作用:DNA单一密码子的改变产生不同的蛋白。*8-遗传变异2(2)碱基类似物引起的间接置换(5-BU,5-AU,

8-NG)5-BU是T的结构类似物,一般以酮式状态存在,可与A配对;有时以烯醇式状态存在,当DNA进行复制时,就只能与G配对。G再正常的与C配对,完成A

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