微生物实验(实验三纯种分离).ppt

微生物学实验实验三（P68.72.78)

微生物菌落形态观察、纯种分离及接种技术一、实验原理纯培养：从一个细胞繁殖得到的微生物后代。获得纯培养的方法：稀释平板分离法1平板划线分离法2单胞挑取法3组织分离法4选择培养基分离5一、实验原理稀释平板分离法：将待分离样品做系列稀释，使样品中的微生物细胞充分分散。取合适稀释度的样品与培养基混合，培养出现菌落。如稀释度适合在培养基平板上即可出现的单个菌落。平板划线分离法：用无菌接种环挑取待分离材料，在平板培养基表面划线稀释而获得单菌落的方法。二、实验内容每人从实验二稀释平板测数法的培养基平板上选定一个孤立的菌落，采用划线法分离、纯化出一个菌株。观察、比较、识别从土壤中分离的细菌、放线菌、霉菌的菌落特征。学习无菌操作（倒培养基平板、接种环灭菌、划线分离）的基本方法。三、实验方法倒培养基平板STEP1用实验一配制的培养基STEP2每人一个STEP3接种环灭菌STEP4火焰灼烧灭菌挑菌，划线挑菌量要少镜检，菌体单一无杂菌污染选取单菌落培养得到单菌落无菌基本操作——倒培养基平板无菌操作，在超净工作台酒精灯火焰旁操作三、实验方法倒培养基平板STEP1用实验一配制的培养基STEP2每人一个STEP3接种环灭菌STEP4火焰灼烧灭菌挑菌，划线挑菌量要少镜检，菌体单一无杂菌污染选取单菌落培养得到单菌落无菌基本操作——接种环灼烧灭菌接种和分离工具接种针2.接种环3.接种钩4.5.玻璃涂棒6.接种圈7.接种锄8.小解剖刀接种环灼烧灭菌三、实验方法倒培养基平板STEP1用实验一配制的培养基STEP2每人一个STEP3接种环灭菌STEP4火焰灼烧灭菌挑菌，划线挑菌量要少镜检，菌体单一无杂菌污染选取单菌落培养得到单菌落无菌基本操作——划线分离平板划线分离方法1.分区划线法2.连续划线法3.方格法4.放射法5.四格法1.严格按照无菌操作要求进行操作；2、划线时接种环与平板之间保持较小角度（＜30℃）；3、划线时用力小，不能将培养基划破；4、挑菌量不宜太多。