生物分离工程-细胞破碎.ppt

分离因数离心力（单位质量）粒子的重力沉降速度Stokes定律：粒子的离心沉降速度离心分离方法差速离心——工业上最常用的离心分离方法菌体、细胞大小/μm离心力/g实验室工业规模大肠杆菌2-4150013000酵母2-715008000血小板2-45000－红细胞6-91200－淋巴球7-12500－肝细胞20-30800－事先在离心管中用某种低分子溶质调配好密度梯度，在密度梯度之上加待处理的料液后进行离心。区带离心——多用于生化研究蔗糖、CsCl、NaBr常用密度梯度物质：实验室常用的转子23%Option1碟片式离心机适用范围细菌、酵母菌、放线菌、细胞碎片是传统离心机，为目前工业上应用最广泛的离心机。分离因数可达1000-20000，最大处理量达到300m3/h，常用于大规模的分离过程。30%Option2离心分离设备0102管式离心机细胞、细胞碎片、细胞器、病毒、蛋白质、核酸等。特别适合一般分离机难以分离的固形物含量1%发酵液的分离。管式离心机是一种分离效率很高的离心分离设备，其转鼓细长，可在15000-50000的高转速下工作，分离因数可达104-6×105。它设备简单、操作稳定。适用范围特别适合固形物含量较多的悬浮液的分离。适用范围倾析式分离机是一种靠离心力和螺旋的推动力作用自动连续排渣的离心机。具操作连续、适应性强、结构紧凑和维修方便的优点。分离因数为1500-3000。全发酵液的提取:从悬浮液中直接提取生化物质双水相萃取膜技术扩张床(膨胀床):expendedbedadsorption14.3全发酵液提取膨胀床操作过程14.1发酵液的预处理影响发酵液后处理的主要因素粘度,杂蛋白影响树脂对产物的吸附能力；在萃取操作中，易产生乳化，不利于两相的分离；污染滤膜，降低滤速高价无机离子当采用离子交换法提取产物时，影响树脂对生化物质的交换容量降低发酵液粘度去除杂蛋白1.1凝聚和絮凝技术这两项技术能有效地改变细胞、菌体和蛋白质等胶体粒子的分散状态、使之聚集，增大体积，利于过滤，常用于菌体细小且粘度大的发酵液预处理中。定义：在中性盐作用下，由于双电层排斥电位的降低，而使胶体体系不稳定的现象，称凝聚。φsφdζ电位：可测凝聚ζ电位：ζ电位与扩散层厚度δ和电动电荷密度q成正比。扩散成厚度δ又与溶液的离子强度I有关。高价阳离子的存在，可压缩扩散层厚度，使电位迅速降低。常用凝聚剂——高价阳离子凝聚能力的次序为：Al3+Fe3+H+Ca2+Mg2+K+Na+Li+常用电解质：Al2(SO4)3·18H2O、AlCl3·6H2O、FeCl3、ZnSO4、MgSO4定义：是指在某些高分子絮凝剂存在下，基于架桥作用，使细胞聚集形成粗大的絮凝团的过程。絮凝01020304人工高分子聚合物：聚丙烯酰胺、聚苯乙烯，聚乙稀亚胺的衍生物01天然有机高分子絮凝剂：壳聚糖、葡聚糖、明胶、骨胶03无机高分子聚合物：聚合铝盐、聚合铁盐02微生物絮凝剂：糖蛋白，粘多糖，纤维素，核酸04常用絮凝剂：聚丙烯酰胺絮凝剂絮凝剂的分子量02搅拌速度04搅拌时间05絮凝剂的加量01溶液的pH03影响絮凝的因素1.2杂蛋白的其他去除方法变性沉淀热变性：适于热稳定物质大幅度调整pH：根据产物特性反向调节，加有机溶剂等电点沉淀在酸性溶液中，蛋白质与阴离子形成沉淀，如：三氯乙酸，水杨酸盐，钨酸盐，苦味酸盐，鞣酸盐，过氯酸盐等在碱性溶液中，与阳离子形成沉淀，如：Ag+，Cu2+，Zn2+，Fe3+，Pb2+等化合法沉淀Ga2+：加入草酸和草酸盐，生成草酸钙；加入磷酸盐，生成磷酸钙Mg2+：加入草酸；加入磷酸盐，生成磷酸镁；三聚磷酸钠（Na5P3O10），生成可溶性络合物Fe3+：加入黄血盐，生成普鲁士兰沉淀14.1.3高价无机离子的去除14.2发酵液的固液分离2.1影响固液分离的因素2.2过滤定义：在一定的压力差下，利用多孔性介质截留固液悬浮液中的固体粒子，进行固液分离的方法称为过滤。无定形颗粒：无烟煤、砂、颗粒活性炭、铁矿砂等1成形颗粒：烧结金属、烧结塑料以及用合成树脂粘结的硅砂、塑料颗粒等，做成圆筒形或板状。2非金属织补棉：化学纤维、玻璃纤维织品、长纤维滤布、短纤维滤布。3金属织布：不锈钢丝或铁丝等的织布。4无纺品：纸、毡、石棉板、合成纤维无纺布等。5过滤介质被过滤液体的特性固形物含量1-10％是采用连续式过滤机的极限。生产规模：大规模——连