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帽子结合蛋白PolyA结合蛋白met40S60SMetMet40S60SmRNAeIF-2B、eIF-3、eIF-6①elF-3②GDP+Pi各种elF释放elF-5④ATPADP+PielF4E,elF4G,elF4A,elF4B,PAB③MetMet-tRNAiMet-elF-2-GTP真核生物翻译起始复合体形成过程原核和真核生物中各种起始因子的生物功能010203延长阶段由一循环反应过程来完成,每次循环增加一个氨基酸残基。在翻译起始复合体形成的基础上,活化氨基酸在核糖体上反复翻译mRNA上的密码并缩合生成多肽链的循环反应过程,称为核糖体循环。核糖体循环包括多肽链合成的进位、转肽、脱落和移位三步反应。三、肽链的延长即与mRNA下一个密码相对应的氨基酰tRNA进入核糖体的A位。此步骤需GTP,Mg2+,和EF-T参与。进位转肽01是由肽基转移酶(peptidyltransferase)催化的肽键形成过程。在肽基转移酶的催化下,将给位上的tRNA所携带的fMet基或肽酰基转移到受位上的氨基酰tRNA上,与其?-氨基缩合形成肽键。02转肽反应过程移位延长因子EF-G有转位酶(translocase)活性,可结合并水解1分子GTP,促进核糖体向mRNA的3侧移动相当于一个密码的距离,同时使肽酰基tRNA从A位移到P位。此步骤需GTP和Mg2+参与。12移位反应过程进位移位转肽核糖体循环的反应过程多肽链合成的延长因子核糖体沿mRNA链滑动,不断使多肽链延长,直到终止信号进入A位。A识别:RF(释放因子)识别终止密码,进入核糖体的A位水解:RF使转肽酶变为酯酶,多肽链与tRNA之间的酯键被水解,多肽链释放脱离:模板mRNA、RF以及空载tRNA与核糖体脱离B四、肽链合成的终止和释放多肽链合成的终止过程GTPUAG53COO-原核生物释放因子:RF-1,RF-2,RF-3真核生物释放因子:eRFRF的生物学功能主要有:识别终止密码,如RF-1特异识别UAA、UAG;而RF-2可识别UAA、UGA。诱导转肽酶改变为酯酶活性,酯键被水解,相当于催化肽酰基转移到水分子-OH上,使肽链从核蛋白体上释放。——使蛋白质合成高速、高效进行。多聚核糖体(polysome)由若干核蛋白体结合在一条mRNA上同时进行多肽链的翻译所形成的念球状结构称为多聚核蛋白体(polysome)。多聚核糖体电镜下的多聚核蛋白体现象五、蛋白质前体的加工(一)一级结构的加工修饰1、N端fMet或Met的切除脱甲酰基酶或氨基肽酶①去甲酰化:脱甲酰化酶甲酰蛋氨酸-肽甲酸+蛋氨酸-肽②去蛋氨酰基:蛋氨酸氨基肽酶蛋氨酰-肽蛋氨酸+肽一、核糖体的结构二、rRNA5SrRNA23SrRNA16SrRNA5.8SrRNA5SrRNA28SrRNA18SrRNA真核生物原核生物P位:肽酰位(peptidylsite)原核生物翻译过程中核糖体结构模式E位:排出位(exitsite)A位:氨基酰位(aminoacylsite)三、核糖体的功能mRNA结合部位1结合或接受AA-tRNA部位2结合或接受肽基tRNA的部位3肽基转移部位4形成肽键的部位(转肽酶的中心)5负责肽链合成的各种因子的结合位点6活性中心:功能位点AP肽基转移酶位点肽酰结合位点(P位)氨酰接受位点(A位)mRNA结合位点小亚基大亚基UAC氨酰-tRNA肽酰-tRNAAACE第四节蛋白质合成的生物学机制参与蛋白质生物合成的物质包括三种RNAmRNA(messengerRNA,信使RNA)rRNA(ribosomalRNA,核糖体RNA)tRNA(transferRNA,转移RNA)20种氨基酸(AA)作为原料酶及众多蛋白因子,如IF、eIFATP、GTP、无机离子氨基酸的活化肽链合成的起始肽链的延长肽链合成的终止和释放新合成多肽链的折叠和加工处理02蛋白质生物合成的过程01一、氨基酸的活化氨基酸+tRNA氨基酰-tRNAATPAMP+PPi氨基酰-tRNA合成酶第一步:活化第二步:转移氨基酰tRNA合成酶催化的反应:氨基酸+ATP-E→氨基酰-AMP-E+PPi第一步:活化反应氨基酰-AMP-E第二步:转移反应01+02tRNA03↓04氨基酰-tRNA05+
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