实验五-种子呼吸强度的测定.pptVIP

实验五植物呼吸强度的测定

------小篮子法

呼吸速率是植物生命活动最重要的指标之一，在植物生理研究中常有测定必要。学习呼吸强度的碱吸收测定方法；了解环境因素（如温度）对呼吸强度的影响。材料：萌发的水稻种子仪器：呼吸测定装置；酸式滴定管；天平；温度计；移液管。试剂：0.05mol/L的Ba(OH)2；1/44mol/L草酸溶液；1%酚酞指示剂。1）取2个三角瓶（配橡皮塞），用移液管分别向其准确加入0.05mol/LBa(OH)2溶液20ml，立即塞紧橡皮塞。2）分别称取萌发种子和沸水煮死种子各20.0g用纱布包扎好将其制作成小篮子，将小篮子悬在瓶内，立即塞紧瓶塞，并开始计时，每隔3-5min轻轻摇动三角瓶，以利于对CO2的吸收（？）。3）20min后（时间过长过短都不好），小心打开橡皮塞，迅速取出小篮子，加入1-2滴酚酞指示剂，立即重新塞紧，用酸式滴定管于三角瓶内滴加1/44mol/L草酸至红色突然消失为止，记下实验组（V1）和对照组（V2）各自草酸用量ml数。V2：空白（死种子）滴定用去的草酸量（ml）；V1：样品滴定用去的草酸量（ml）；W：样品鲜重（g）；t：测定时间（h）。1）几个小篮子内放进的小麦种子重量一定要相同（20g）。2）反应中产生的BaCO3薄膜影响CO2吸收，间或摇动广口瓶；3）开塞、加酚酞、盖塞要迅速，以防外界CO2进入；4）防止口中呼出的气体浸入瓶内；5）把握红色消失第1点。**呼吸作用（respiration)：是指生活细胞内的有机物，在一系列酶的参与下，逐步氧化分解成简单物质，并释放能量的过程。呼吸作用是一切生物的共性，呼吸作用的强弱及呼吸速率的大小是生命活动的重要指标之一。呼吸速率(respiratoryrate)：又称呼吸强度,指单位时间内单位重量的植物材料释放的CO2的量或吸收O2的量。测定植物呼吸速率的方法测定呼吸速率的方法很多，可以分成两大类：测定吸O2速率（测压法、氧电极法等）或者测定放出CO2速率（小篮子法、气流法、红外线CO2气体分析仪法等）。测压法、氧电极法是测定植物呼吸过程对O2的吸收，样品用量少，且精确度高。小篮子法是测定植物呼吸过程CO2的释放，虽然精确性差，但方法简便。气流法适用于测定大量样品（如植物的块茎、块根、瓜果类）的呼吸速率。利用红外线CO2气体分析仪测定植物呼吸速率比较快速、准确，是科研上常采用的方法。1.实验目的及意义2.实验原理植物进行呼吸时放出CO2，计算一定的植物样品在单位时间内放出CO2的数量，即为该样品的呼吸速率。1）呼吸放出的CO2可用Ba(OH)2溶液吸收Ba(OH)2+CO2→BaCO3↓+H2O2）实验结束后用已知浓度的草酸滴定剩余的Ba(OH)2溶液Ba(OH)2（剩余）+H2C2O4→BaC2O4↓+2H2O3）从空白和样品二者消耗草酸溶液之差即可计算出呼吸过程中释放的CO2的量3.材料、仪器设备与试剂4.实验步骤1）取2个三角瓶（配橡皮塞），装置如图所示。用移液管分别准确加入0.05mol/LBa(OH)2溶液20.00ml，立即塞紧橡皮塞。2）分别称取萌发种子和沸水煮死种子各20.0g用纱布包扎好将其制作成小篮子，将小篮子悬在瓶内，立即塞紧瓶塞，并开始计时，每隔3-5min轻轻摇动三角瓶，以利于对CO2的吸收（？）。3）30min后（时间过长过短都不好），小心打开橡皮塞，迅速取出小篮子，加入1-2滴酚酞指示剂，立即用保鲜膜密封瓶口，分别用1/44mol/L草酸滴定两个三角瓶内剩余的碱液至红色突然消失为止，记下实验组（V1）和对照组（V2）各自草酸用量ml数。实验步骤呼吸速率(mgCO2·g－1Fw·h－1)空白与呼吸草酸用量差值(ml)呼吸滴定草酸用量(ml)终止反应时间开始反应时间样品重(g)处理（温度）表1小篮子法测定水稻种子呼吸强度的数据记录表5.结果与分析Ba(OH)2+CO2→BaCO3↓+H2OBa(OH)2（剩余）+H2C2O4→BaC2O4↓+2H2O呼吸速率（mgCO2/g﹒h）＝W×T（V2－V1）××441446.注意事项