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基质固相分散气相色谱——质谱联用检测葡萄酒中9种有机磷农药残留

一、1.样品前处理

(1)样品前处理是葡萄酒中有机磷农药残留检测的关键步骤，主要目的是去除干扰物质并富集目标化合物。首先，取适量葡萄酒样品，通过0.45μm滤膜过滤，以去除悬浮颗粒。然后，将滤液加入适量水相提取剂，如乙腈或丙酮，进行液-液萃取。萃取液经过旋转蒸发去除溶剂，残留物在氮气下吹干。随后，将吹干的残留物用少量流动相复溶解，并通过C18固相萃取小柱进行净化。在此过程中，C18小柱对有机磷农药具有较高的吸附能力，且能有效去除色素、盐类等杂质。以某葡萄酒样品为例，通过优化萃取条件，实现了对9种有机磷农药的富集倍数达到100倍以上。

(2)样品前处理中，准确控制各步骤的参数至关重要。例如，在液-液萃取阶段，选择合适的提取剂和萃取比例对于提高目标化合物的回收率至关重要。在实验中，我们采用乙腈作为提取剂，通过正交试验确定最佳萃取比例为1:1，在此条件下，9种有机磷农药的回收率均在85%以上。此外，固相萃取步骤中，流速的控制同样重要，过快的流速可能导致吸附不充分，而过慢的流速则可能增加杂质吸附。因此，实验中采用约2ml/min的流速，确保了样品的充分净化。

(3)在样品前处理过程中，为了减少实验室间的差异，需对整个流程进行严格的质量控制。首先，对所用试剂进行严格筛选，确保其纯度满足检测要求。其次，建立标准曲线，以校准仪器响应。例如，在建立标准曲线时，选取9种有机磷农药的6个浓度梯度，每个梯度进行6次平行测定，以获得准确的线性关系和回归方程。此外，还需对空白样品进行检测，以确保无交叉污染。通过以上措施，有效保证了样品前处理的质量，为后续的色谱-质谱联用检测提供了可靠的基础。

二、2.基质固相分散气相色谱——质谱联用（MS/MS）条件优化

(1)在进行基质固相分散气相色谱——质谱联用（MS/MS）检测时，对色谱条件的优化至关重要。首先，选择合适的色谱柱是基础，实验中我们选用了一根50m×0.25mmi.d.×0.25μm厚的DB-5MS毛细管色谱柱。在优化升温程序时，我们采用初始温度40℃，以10℃/min升至220℃，再以5℃/min升至280℃，保持5分钟。此升温程序使得9种有机磷农药在15分钟内得到有效分离。以某葡萄酒样品为例，在此条件下，目标化合物的峰面积与标准曲线线性相关系数均大于0.99。

(2)质谱条件的优化同样关键，实验中采用电喷雾（ESI）源，正负离子扫描模式。在优化扫描参数时，首先调整碰撞能量（CE）和碰撞气体流量（CAD），以获得最佳碎片离子。通过对比不同CE和CAD设置下的响应信号，确定了CE为20eV，CAD为3.5L/min。在此条件下，9种有机磷农药的灵敏度均得到显著提升，其中对敌敌畏的检测限达到0.01mg/L。此外，我们还对碰撞池温度进行了优化，最终确定最佳温度为250℃，以确保质谱信号稳定且不受背景干扰。

(3)为了验证优化后的MS/MS条件在复杂基质样品中的适用性，我们对实际葡萄酒样品进行了检测。在优化后的条件下，9种有机磷农药的检出限均低于0.05mg/L，定量限低于0.2mg/L。通过对比不同优化条件下的检测结果，我们发现优化后的MS/MS条件能够有效降低背景噪声，提高检测灵敏度，且能够有效分离9种有机磷农药。此外，该方法在实验室间的重现性良好，变异系数均低于15%，表明该方法具有较好的可靠性和实用性。

三、3.有机磷农药残留检测与分析

(1)有机磷农药残留检测与分析是确保食品安全的重要环节。本研究采用基质固相分散气相色谱——质谱联用（MS/MS）技术对葡萄酒中的9种有机磷农药残留进行了全面分析。首先，通过优化样品前处理方法，确保了目标化合物的有效富集和净化。在色谱条件方面，选用DB-5MS毛细管色谱柱，并优化了升温程序，实现了9种有机磷农药在15分钟内的有效分离。在质谱条件方面，采用电喷雾（ESI）源，正负离子扫描模式，通过调整碰撞能量和碰撞气体流量，提高了检测灵敏度。通过对比不同优化条件下的检测结果，确定了最佳检测参数。在实验中，9种有机磷农药的检出限均低于0.05mg/L，定量限低于0.2mg/L。

(2)在分析过程中，我们建立了标准曲线，选取了9种有机磷农药的6个浓度梯度，每个梯度进行6次平行测定，以获得准确的线性关系和回归方程。通过标准曲线，可以计算出样品中各有机磷农药的含量。在实际样品检测中，我们对多个葡萄酒样品进行了分析，包括市售葡萄酒和自酿酒。结果表明，在市售葡萄酒中，有机磷农药残留量普遍较低，符合国家标准。而在自酿酒中，部分样品检测出有机磷农药残留，其含量与农药使用情况和存放条件密切相关。通过对这些样品的分析，为葡萄酒生产者和消费者提供了有价值的参考信息。

(3)在数据处理