《三维设计 新课标高考总复习 生物》课件 第1讲 全面落实“基因工程及生物技术的安全性与伦理问题” 的主干知识.pptx

;整合大概念;1．切割质粒的限制性内切核酸酶均能特异性地识别6个核苷酸序列。 ()

2．E.coliDNA连接酶既可连接平末端，又可连接黏性末端。 ()

3．载体的作用是携带目的基因导入受体细胞中，使之稳定存在并表达。 ()

4．用PCR方法扩增目的基因时必须知道基因的全部序列。 ()

5．外源DNA必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制。 ()

6．蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作，定向改变分子的结构。

()

7．在电泳时，DNA分子的迁移速率与DNA分子的大小和构象有关，与DNA分子的带电量和带电性质无关。 ()

8．“设计试管婴儿”与“试管婴儿”的技术操作过程是完全相同的。 ();系统学习(一)重组DNA技术的基本工具(固基点)

主干知识·记准理清

(一)基因工程的概念

;(二)基因工程的基本工具

1．限制性内切核酸酶——“分子手术刀”

;2.DNA连接酶——“分子缝合针”

3.基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”

;(三)DNA的粗提取与鉴定

1．实验原理

DNA、RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面存在差异，可以利用这些差异，选用适当的____________方法对它们进行提取。

(1)DNA不溶于______。

(2)DNA在不同浓度的__________中溶解度不同，它能溶于________的NaCl溶液。

(3)在一定温度下，DNA遇_______试剂会呈现蓝色。;2．实验步骤

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1．(选择性必修3P71旁栏思考拓展)限制酶来源于原核生物，为什么不能切割自己的DNA分子？

提示：限制酶具有特异性，即一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的位点上进行切割。限制酶不切割自身DNA的原因是原核生物DNA分子中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。

2．(选择性必修3P72旁栏思考拓展)DNA连接酶和DNA聚合酶的作用相同吗？试简要说明。

提示：不相同。DNA连接酶连接的是两个DNA片段，而DNA聚合酶是将单个脱氧核苷酸依次连接到DNA单链的末端。;题点考法·练全练通

考法(一)考查基因工程的操作工具

1．下面是3种限制性内切核酸酶对DNA分子的识别序列和剪切位点图(箭头表示切点，切出的断面为黏性末端)。下列叙述不正确的是 ()

A．不同的限制酶有不同的识别序列和切割位点，体现了酶的专一性

B．限制酶2和3识别的序列都包含6个碱基对

C．限制性酶1和酶3剪出的黏性末端相同

D．能够识别和切割RNA分子内一小段核苷酸序列的酶只有限制酶2

;解析：由图可知，限制酶2和3识别的序列分别是CCGCGG和GGATCC，均为6个碱基对，B正确；限制酶1和3剪出的黏性末端相同，均为GATC，C正确；限制酶只能识别特定的DNA序列，且具有专一性，因此三种限制酶均不能识别和切割RNA中的核糖核苷酸序列，A正确，D错误。

答案：D;2．图(a)中的三个DNA片段上依次表示出了EcoRⅠ、BamHⅠ和Sau3AⅠ三种限制酶的识别序列与切割位点，图(b)为某种表达载体的示意图(载体上的EcoRⅠ、Sau3AⅠ的切点是唯一的)。

根据基因工程的有关知识，回答下列问题：

(1)经BamHⅠ酶切后得到的目的基因可以与上述表达载体被________酶切后的产物连接，理由是____________________________________________________。;(2)若某人利用图(b)所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含有目的基因的重组子，如图(c)所示，这三种重组子中，不能在宿主细胞中表达目的基因产物的有________，不能表达的原因是__________________________________________。

(3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有________________和________________，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是_______________________________________________。;解析：(1)由于限制酶Sau3AⅠ与BamHⅠ切割DNA后形成的黏性末端相同，所以经BamHⅠ酶切割得到的目的基因可以与上述表达载体被Sau3AⅠ酶切后的产物连接。(2)在基因表达载体中，启动子应位于目的基因的首端，终止子应位于目的基因的尾端，这样目的基因才能表达。图中甲、丙均不符合，所以不能表达目的基因产物。(3)常见的DNA连接酶有E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶，其中既能连接黏性末端