地龙多肽-钙螯合物的制备、性质及其应用研究.pdf

天津科技大学

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作者签名:吴明均

日JUJ:2o~年6月♀日

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作者报名:};呐询

日JUJ:ν~)年6月8日

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作者签名:真利沟日期:如12.~年6月g日

导师签名:份钱日肌ω年6月8日

摘要

钙在人体内代谢中起到重要作用，螯合钙与传统钙补充剂相比有更高的吸收利

用率以及较低的毒副作用。多肽作为配体与钙结合有许多好处，如低能耗、运输快

和载体饱和度最小，并可与钙离子形成可溶性稳定的螯合物。地龙作为药食同源的

材料，其中蛋白质含量在70%左右，并且研究发现了地龙蛋白具有成骨作用，以及

有利于螯合钙离子的氨基酸含量丰富，是制备多肽螯合钙的良好选择。本文以地龙

蛋白为原料经过酶解超滤得到不同分量地龙多肽，之后使用不同分子量多肽与钙离

子螯合，并对肽钙螯合物进行表征；对肽钙螯合物的稳定性以及抗氧化性进行检测；

利用海藻酸钠与肽钙螯合物制备凝胶球，并对其进行表征。主要研究结果如下：

首先，将地龙蛋白经过酶解和超滤后，得到了不同分子量的地龙多肽，随着分

子量的减小，粒径也减小，而电位绝对值增大，且分子量500Da的地龙多肽（EPP-

5）的蛋白质含量与钙含量最高，分别为79.52±0.06%、11.28±0.05mg/g；随后制备

了不同分子量的地龙多肽螯合钙，其中EPP-5与钙离子的螯合度最高，为121.11±

2.08mg/g；并对多肽钙螯合物进行了表征，在螯合钙前后宏观状态发生了显著变化，

其颜色变的更绿更蓝；地龙蛋白以及不同分子量多肽在螯合钙后粒径增大到了390-

420nm，电位绝对值从14mV左右减小到5mV左右；通过光谱分析，发现了地龙多

肽的主要结合位点是肽键的羧基氧、羟基氧、氨基氮，这些基团与Ca2+配位形成多

肽-钙螯合物。

其次，对地龙多肽钙螯合物进行稳定性实验。在探究在不同温度下的稳定性中

发现，在75℃以下时，分子量1000Da的地龙多肽螯合钙样品稳定性最高，其钙保

留率在93%以上；在探究在不同pH下的稳定性中发现，pH为4-8时，分子量1000

Da的地龙多肽螯合钙样品具有较高的稳定性，其钙保留率在90%以上；在探究磷酸

盐中的稳定性中发现，当磷酸盐浓度为5mmol/L时，分子量1000Da的地龙多肽螯

合钙样品稳定性最高，其钙保留率在80%以上，但随着磷酸盐浓度的增加，所有螯

合钙样品稳定性都逐渐下降。在探究