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高表达Ang1基因的间充质干细胞的建立及其肺内转化研究徐金富瞿介明李惠萍等同济大学附属上海市肺科医院复旦大学附属华东医院
Highpromiseforangiopoietin-1(Ang1)inlunginjuryinterventionAng1decreasedinLPSinducedlunginjuryanti-inflammation:inhibitsendothelialpermeability,neutrophiladherenceandIL-8productionAnti-apoptosisroletoendothelialcellsThurstonG,RudgeJS,IoffeE,etal.Angiopoietin-1protectstheadultvasculatureagainstplasmaleakage.NatMed.2000,6:460-463.
DalyC,WongV,BurovaE,etal.Angiopoietin-1modulatesendothelialcellfunctionandgeneexpressionviathetranscriptionfactorFKHR(FOXO1).GeneDev.2004,18(9):1060-1071.
PizurkiL,ZhouZ,GlynosK,etal.Angiopoietin-1inhibitsendothelialpermeability,neutrophiladherenceandIL-8production.BritJPharmacol.2003,139(2):329-336.
Mesenchymalstemcells(MSC)NoethicaldifficultiesharvestMSCfromtheindividualtobetreatedNorejectionproblemsSelfmigratetowheretheinjuryislocatedRojasM,XuJ,WoodsCR,etal.Bonemarrow-derivedmesenchymalstemcellsinrepairoftheinjuredlung.AmJRespirCellMolBiol2005;33:145–152
RobertJD，AnnemarieBM．mesenchymalstemcells：biologyandpotentialclinicaluses.ExperimentalHematology,2000,28(8):87
Ourhypothesis+Ang1MSCsByLentiviralvectorMSCstransducedwithAng1MiceLPSinducedlunginjuryInvivointervention
Methodsandresults
pCR2.1-Ang1:Prof.FedericoBussolinoinInstituteforcancerresearchandtreatment,Italy
Sequencingresults:100%coincidewithAng1cDNAsequence
Electrophoresisaftercuttingbyrestrictionenzyme
pLVpCMV-dR8.74pMD2GInvitroLentivirus-mediatedAng1/eGFPtransferintoMSCs
Isolation,purificationandexpansionofMSCsBonemarrowwasharvestedfrom6weeksoldC57BL/6byflushingthefemursandtibiasSeparateMSCsfrombonemarrowbydensitygradientcentrifugationinFicoll(Pharmacia)CulturedandpassagedwithPeister’smethodPeisterA,MelladJA,LarsonBL,HallBM,GibsonLF,ProckopDJ.Adul
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