DB13 135-1992 玉米联合固氮菌剂.docx

河北省标准计量局发布

DB

河北省地方标准

玉米联合固氮菌剂

DB13/135-92

1992-03-01发布1992-03-01实施

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河北省地方标准玉米联合固氮菌剂

DB13/135-92

1主题内容与适用范围

本标准规定了玉米联合固氮菌剂的分类、技术要求、试验方法、检验规则、标志、包装、运输及贮存。

本标准适用于以蔗糖为主要原料，采用优良菌株，经液体深层发酵法生产的液体和以

草炭作为菌液吸附剂制成固体的玉米联合固氮菌剂.

2产品分类

按菌剂的形态分为液体菌剂和固体菌剂两种.

3技术要求

3.1菌体菌落形态

革兰氏染色阴性，无芽孢、杆状、周生鞭毛、运动、后期菌体有荚膜，在玉米联合固氮菌专用培养基平板上，菌落呈园形，边缘整齐，微突起，无色，表面光滑，半流质，吲哚反应阴性。

3.2技术指标

3.2.1液体菌剂

项目

成品指标

有效期内指标

外观

乳白至乳黄色均匀混浊液体

略有絮状沉淀，摇动呈均匀混浊液体

气味

40亿

无异味

或微酸味

20亿

联合固氮菌含量个/ml

杂菌量%

5

PH值

6.0

~7.5

河北省标准计量局1992-03-01批准1992-03-01实施

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3.2.2固体菌剂

项自

成品指标

有效期内指标

外观

黑褐色粉状固体，湿润，松散

气味

无异味或微酸味

含水量%

28~33

联合固氮菌含量个/ml

5亿

3亿

杂菌量%

15

PH值

6.0~7.5

3.3吸附剂(草炭)主要指标见附录A.

4试验方法

4.1仪器设备及试剂

4.1.1仪器设备：生物显微镜

摇床往复式，180~200次/min

恒温培养箱恒温烘干箱超净工作台

酸度计

茂福炉

分析天平扭力天平架盘天平

标准筛80目

环刀

铝盒

4.1.2试剂

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玉米联合固氮菌专用固体培养基无菌水

除CO?蒸馏水

4.2成品检验

4.2.1外观

取液体菌剂供检样5瓶，摇匀，固体菌剂供检样300g放于洗净的白色塘瓷盘中，均在明亮光线下感观检验。

4.2.2气味

感观检验。

4.2.3含水量测定

采用烘干法，测定固体菌剂。

用感量0.1g的架盘天平称取固体菌剂10.0g,放入已恒重的称量瓶中，在烘干箱内105℃恒温烘干4h,移至干燥器内，待冷却至常温，称重，反复烘干，称至恒重，根据烘干前后重量差，计算菌剂含水量，每个样品重复三次，平行样绝对偏差应低于0.5g.含

水量计算公式：

式中：m。表示烘干前样品质量(g);m,表示烘干后样品质量(g)。

4.2.4联合固氮菌和杂菌含量测定

………

…(1)

a.显微镜观察计数

b.采用微生物的平板菌落计数法。液体菌剂直接稀释，固休菌剂需制成菌悬液，连续稀释，即用感量0.01的扭力天平在无菌称量纸上称取固体菌剂10.00g,加入盛有90ml无菌水和玻璃珠的250ml三角瓶中，置于摇床，180~200次/min振荡20min,在无菌条件下，用刻度吸管吸取菌悬液，按常规系列稀释法，固体菌剂稀释10-~-8,液体菌剂稀释至10-8~-.将菌悬液均匀涂于玉米联合固氮菌专用固体培养基平板上，三次电复培养，计平板菌落数，计算公式：

菌剂含菌数=菌落平均数×稀释倍数……………(2)

液体菌剂含菌数以亿个/ml表示，固体菌剂含菌数以亿个/g表示.

根据玉米联合固氮菌的菌落特征判定，分别计出联合固氮菌数和杂菌数。

4.2.5.PH值测定

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采用酸度计测定

a.液体菌剂：取供检菌液直接测定。

b.固体菌剂：用感量0.1g的架盘天平称取固体菌剂10.0g于250ml的三角瓶中，加人除CO?的蒸馆水50ml(包括菌剂含水量),在摇床上振荡15min(180~200次/min),用酸度计测定。

4.3有效期内菌剂活菌数检验

玉米联合固氮菌菌数检验方法同4.2.4

4.4吸附剂(草炭)检验

草炭质量检验方法见附录A.

5检验规则

5.1检验分类

5.1.1成品萬剂检验

5日内进行成品检验。

5.1.2有效期内菌剂检验

在产品有效期内进行。

5.2检验项目

同3.2.13.2.2(表)中各项.

5.3样品采集

5.3.1取样方法

随机抽样。

5.3.2取样数量

产品按每一发酵罐包装的为一批，以箱为抽样单位，液体菌剂每500~1000箱抽样10~20箱，每箱抽一瓶，每瓶吸10ml,同