DB13 134-1992 小麦联合固氮菌剂.docx

河北省标准计量局发布

DB

河北省地方标准

小麦联合固氮菌剂

DB13/134-92

1992-03-01发布1992-03-01实施

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河北省地方标准小麦联合固氮菌剂

DB13/134-92

1主题内容与适用范围

本标准规定了小麦联合固氮菌剂的分类、技术要求、试验方法、检验规则、标志、包装、运输及贮存.

本标准适用于以蔗糖为主要原料，采用优良菌株，经液休深层发酵法生产的液休和以草炭作为菌液吸附剂制成固体的小麦联合固氮菌剂.

2产品分类

按形态不同分为液体菌剂、固体菌剂两种。

3技术要求

3.1菌体和菌落形态

革兰氏染色阴性，无芽孢，杆状，菌休生厚英膜，不运动，在小麦联合固氮菌专用培养基平板上，菌落呈园形，微突起，无色，表而光滑，半流质，吲哚反应阳性。

3.2技术指标

3.2.1液体菌剂

项目

成品指标

有效期内指标

外观

乳白至乳黄色均匀混浊液体

略有絮状沉淀，摇动能呈均匀混浊液体

气味

无异味

50亿

或微酸味

20亿

联合固氮菌含量个/ml

杂菌量%

5

PH值

6.0~

7.0

河北省标准计量局1992-03-01批准1992-03-01实施

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3.2.2固体菌剂

项目

成品指标

有效期内指标

外观

黑褐色粉状固体，湿润，松散

气味

无异昧或微酸味

含水量%

26~32

联合固氮菌含量个/g

5亿

3亿

杂菌量%

15

PH值

6.0~7.0

3.3吸附剂(草炭)主要指标见附录A.

4试验方法

4.1仪器设备及试剂

4.1.1仪器设备：

生物显微镜

摇床往复式，180~200次/min

恒温培养箱恒温烘干箱超净工作台酸度计

茂福炉

分析天平扭力天平架盘天平

标准筛80日

环刀

铝盒

4.1.2试剂

小麦联合固氮菌专用固体培养基

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无菌水

除CO?蒸馏水

4.2成品检验

4.2.1外观

取液体菌剂供检样5瓶，摇匀，固体菌剂供检样300g放于洗净的白色塘瓷盘中，均在明亮光线下感观检验。

4.2.2气味感观检验。

4.2.3含水量测定

采用烘干法测定固体菌剂。

用感量0.1g的架盘天平称取固体菌剂10.0g,放入已恒重的称量瓶中，在烘干箱内105℃恒温烘干4h,移至干燥器内，待冷却至常温，称重，反复烘干，称至恒重，根据烘干前后重量差，计算菌剂含水量，每个样品重复三次，平行样绝对偏差应低于0.5g.含水量计算公式：

…

…

……

(1)

式中：m。表示烘干前样品质址(g);m?表示烘干后样品质量(g).

4.2.4联合固氮菌和杂菌含量测定

a.显微镜观察计数.

b.采用微生物的平板菌落计数法。液体菌剂直接稀释，固体菌剂需制成菌悬液，连续稀释，即用感量0.01的扭力天平在无菌称量纸上称取固体菌剂10.00g,加入盛有90ml无菌水和玻璃珠的250ml三角瓶中，置于摇床，180～200次/min振荡20min,在无菌条件下、用刻度吸管吸取菌悬液，按常规系列稀释法，固体菌剂稀释至10-?~-8,液休菌剂稀释至10-~-9,将菌悬液均匀涂于小麦联合周氮菌专用周体培养基平板上，三次重复，培养，计平板菌落数，计算公式：

菌剂含菌数=菌落平均数×稀释倍数…………(2)

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液体菌剂含菌数以亿个/ml表示，固体菌剂含菌数以亿个/g表示.

根据小麦联合固氮菌的菌落特征判定，分别计出联合固氮菌数和杂菌数.

4.2.5PH值测定

采用酸度计测定。

a.液体菌剂：取供检菌液直接测定。

b.固体菌剂：用感量0.1g的架盘天平称取固体菌剂10.0g于250ml的三角瓶中，加入除CO?的蒸馏水50ml(包括菌剂含水量),在摇床上振荡15min(180~200次/min),用酸度计测定。

4.3有效期内菌剂活菌数检验

小麦联合固氨菌菌数检验方法同4.2.4

4.4吸附剂(草炭)检验

草炭质量检验方法见附录A,

5检验规则

5.1检验分类

5.1.1成品菌剂检验

5日内进行成品检验.

5.1.2有效期内菌剂检验在产品有效期内进行.

5.2检验项目

同3.2.13.2.2(表)中各项.

5.3样品采集

5.3.1取样方法随机抽样。

5.3.2取样数量

产品按每一发酵罐包装的为一批，以箱为抽样单位，液体菌剂每500~100