有机分离分析技术分离技术.ppt

洗脱液的后处理6.柱色谱法分离实例（1）烘干（蒸出溶剂）：自然干燥，通风厨风干，加热至105oC±5oC，2h（可否在烘箱内加热干燥？可否使用电炉加热？）烘干（2）冷却至室温（样品不返潮，重量变化很小）第101页,共105页，星期六，2024年，5月（3）称重：对干燥后的样品分别称重（W’i），计算干燥后的重量1W’148W’4849W’4950W’50洗脱液的后处理6.柱色谱法分离实例ΔWi=W’i-Wi第102页,共105页，星期六，2024年，5月(4)画分布曲线（样品质量分布图）6.柱色谱法分离实例氯仿氯仿-乙醚氯仿-甲醇甲醇第103页,共105页，星期六，2024年，5月（5）红外吸收光谱的等（定性定量）6.柱色谱法分离实例Fig.Infraredspectra(nonionicsurfactant；C12E5)选取峰顶（为什么？）部分的样品，进行红外、TLC等测定。第104页,共105页，星期六，2024年，5月同一个峰下的产品进行合并，称重，并计算它的含量6.柱色谱法分离实例ΔWi（%）=（W’i-Wi）/ΣWi第105页,共105页，星期六，2024年，5月**************二.离心设备

离心机

转子

离心管

附件

第69页,共105页，星期六，2024年，5月（一）.离心机(Centrifugel)

1.低速离心机

转子

电动机

转子带有放置离心管的孔

转子的中央位于离心机的驱动轴上

离心机的转速和温度控制不够准确

一般最高转速在6,000rpm以下

实验室中常用于分离制备。

第70页,共105页，星期六，2024年，5月2.高速离心机

制冷设备温度控制在0-4℃范围内

制动器

实际速度和温度可通过仪表显示

配有一定类型及规格的转子

最高转速在25,000rpm以下

常用于生物大分子的分离制备第71页,共105页，星期六，2024年，5月第72页,共105页，星期六，2024年，5月第73页,共105页，星期六，2024年，5月第74页,共105页，星期六，2024年，5月3.超速离心机

驱动和速度控制

温度控制

真空系统

转子

常用于分离亚细胞器、病毒粒子、DNA、RNA和蛋白质分子。

在分离时无须加入可能引起被分离物质结构改变的物质。

第75页,共105页，星期六，2024年，5月第76页,共105页，星期六，2024年，5月第77页,共105页，星期六，2024年，5月（二）.转子(Rotor)

固定角式转子(fixed-anglerotor)

水平转子(swing-outrotor)

垂直转子(verticalrotor)

带状转子(zonalrotor)

连续转子(continuousrotor)

第78页,共105页，星期六，2024年，5月转子的材质：

铝质较轻,耐受强度较弱,适合在较低

的转速下使用;

不锈钢耐受强度最好,但材质本身太重；

钛合金耐受强度不错,重量也比不锈钢轻。

第79页,共105页，星期六，2024年，5月1.固定角式转子

离心管在离心机中放置的位置与旋转轴心形成一个固定的角度,角度变化在14-40°之间。

常见的角度

20°

28°

34°

40?第80页,共105页，星期六，2024年，5月第81页,共105页，星期六，2024年，5月固定角式转子第82页,共105页，星期六，2024年，5月第83页,共105页，星期六，2024年，5月三.离心分离方法

根据离心原理,按照实际工作的需要，目前已有可设计出各种离心方法综合起来大致可分三类第84页,共105页，星期六，2024年，5月离心分离法差速离心法沉降速度法速率区带离心法等密度离心法沉降平衡法

经典式沉降法第85页,共105页，星期六，2024年，5月?

例用差速离心法分离已破碎的细胞各组份

已破碎的细胞