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控制菌检查
控制菌检查用的培养基应进行培养基的适应性检查,成品培养基、由脱水培养基或按培养基处方配置的培养基均应检查。
菌种试验用菌种的传代次数不得超过5代(从菌种保藏中心获得的冷冻干燥菌种为第0代),并采用适宜的菌种保藏技术进行保存,以保证试验菌株的生物学特性。
大肠埃希菌(Escherichiacoli)[CMCC(B)44102或CVCC1570]
金黄色葡萄球菌(Staphyloccocusaureus)[CMCC(B)26003或CVCC1882]
乙型副伤寒沙门菌(SalmonellaparatyphiB)[CMCC(B)50094]
铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)[CMCC(B)10104]
生孢梭菌(Clostridiumsporogenes)[CMCC(B)64941]
白色念珠球菌(canidiaalbicans)[CMCC(F)98001]
菌液制备接种大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、乙型副伤寒沙门菌、铜绿假单胞菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基或营养琼脂培养基上,生孢梭菌的新鲜培养物至硫乙醇酸盐流体培养基中,培养18~24小时;接种白色念珠球菌的新鲜培养物至改良马丁培养基中或改良马丁琼脂培养基上,培养18~24小时。用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数为10~100cfu的菌悬液。
菌悬液在室温下放置应在2小时内使用,若保存在2~8℃可在24小时内使用。
适应性检查控制菌检查用培养基的适应性检查项目包括促生长能力、抑制能力及指示能力的检查。
表1控制菌检查用培养基的促生长能力、抑制能力及指示能力检查
控制菌检查
培养基
特性
试验菌株
大肠埃希菌
胆盐乳糖培养基
促生长能力
大肠埃希菌
抑制能力
金黄色葡萄球菌
4-甲基伞形酮葡萄糖苷酸培养基
促生长能力+指示能力
大肠埃希菌
曙红亚甲基蓝琼脂培养基或麦康凯琼脂培养基
促生长能力+指示能力
大肠埃希菌
大肠菌群
乳糖胆盐发酵培养基
促生长能力
大肠埃希菌
抑制能力
金黄色葡萄球菌
乳糖发酵培养基
促生长能力+指示能力
大肠埃希菌
曙红亚甲基蓝琼脂培养基或麦康凯琼脂培养基
促生长能力+指示能力
大肠埃希菌
沙门菌
营养肉汤培养基
促生长能力
乙型副伤寒沙门菌
四硫磺酸钠亮绿培养基
促生长能力
乙型副伤寒沙门菌
抑制能力
金黄色葡萄球菌
胆盐硫乳琼脂培养基或沙门、志贺菌属琼脂培养基
促生长能力+指示能力
乙型副伤寒沙门菌
曙红亚甲基蓝琼脂培养基或麦康凯琼脂培养基
促生长能力+指示能力
乙型副伤寒沙门菌
三糖铁琼脂培养基
指示能力
乙型副伤寒沙门菌
控制菌检查
培养基
特性
试验菌株
铜绿假单胞菌
胆盐乳糖培养基
促生长能力
铜绿假单胞菌
抑制能力
金黄色葡萄球菌
溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基
促生长能力
铜绿假单胞菌
抑制能力
大肠埃希菌
绿脓菌素测定用培养基
促生长能力+指示能力
铜绿假单胞菌
金黄色葡萄球菌
亚碲酸盐肉汤培养基
促生长能力
金黄色葡萄球菌
抑制能力
大肠埃希菌
卵黄氯化钠琼脂培养基或甘露醇氯化钠琼脂培养基
促生长能力+指示能力
金黄色葡萄球菌
抑制能力
大肠埃希菌
梭菌
梭菌增菌培养基
促生长能力
生孢梭菌
哥伦比亚琼脂培养基
促生长能力
生孢梭菌
白色念珠菌
沙氏葡萄糖液体培养基
促生长能力
白色念珠菌
沙氏葡萄糖琼脂培养基
促生长能力+指示能力
白色念珠菌
念珠菌显色培养基
促生长能力+指示能力
白色念珠菌
抑制能力
大肠埃希菌
1%聚山梨酯80-玉米琼脂培养基
促生长能力+指示能力
白色念珠菌
液体培养基促生长能力检查分别接种不大于100cfu的试验菌(表1)于被检培养基和对照培养基中,在相应控制菌检查规定的培养温度及最短培养时间下培养。与对照培养基管比较,被检培养基管试验菌应生长良好。
固体培养基促生长能力检查取试验菌各0.1ml(含菌数50~100cfu)分别涂布于被检培养基和对照培养基平板上,在相应控制菌检查规定的培养温度及最短培养时间下培养。被检培养基和对照培养基上生长的菌落大小、形态特征应一致。
培养基抑制能力检查接种不少于100cfu的试验菌(表1)于被检培养基中,在相应控制菌检查规定的培养温度计最长时间下培养,试验菌应不得生长。
固体培养基指示能力检查取试验菌各0.1ml(含菌数50~100cfu)分别涂布于被检培养基和对照培养基平板上,在相应控制菌检查规定的培养温度培养时间下培养。被检培养基上试验菌生长的菌落大小、形态特征、指示剂反应情况等应与对照培养基一致。
液体培养基指示能力检查分别接种不大于100cfu的试验菌(表1)于被检培养基和对照培养基中,在相应控制菌检查规定的培养温度及最短培养时间下培养。与对照培养基
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