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（三）細胞毒試驗51Cr釋放法LDH釋放法凋亡細胞檢測ELISPOT靶細胞51Cr洗滌去除游離的51Cr效應細胞測量上清液中釋放的51Cr混合培養4-6小時細胞毒試驗（51Cr釋放法）示意圖CK抗體包被的反應板CK抗原包被的反應板加入淋巴細胞加入酶標記二抗加入底物檢測抗原特異性B細胞加入底物T細胞產生CK的檢測加入淋巴細胞加入酶標的CK抗體（一）凝集反應(agglutination)?顆粒性Ag與相應Ab在電解質存在的條件下結合，出現肉眼可見的凝集物。?直接凝集反應間接(被動)凝集反應1.直接凝集反應①玻片法： 定性，已知抗體測未知抗原細菌的鑒定和分型人類ABO血型測定

1.直接凝集反應②試管法： 半定量，用已知抗原測未知抗體的量肥達氏試驗-----診斷傷寒和付傷寒間接凝集反應：可溶性Ag/Ab先吸附在某些顆粒載體上，形成為致敏顆粒，再與相應Ab/Ab結合，出現凝集現象.常用的載體顆粒乳膠顆粒人O型RBC、綿羊RBC2.間接凝集反應可溶性抗原 載體顆粒免疫微球（致敏載體）＋＋抗體凝集(二)沉澱反應概念：可溶性Ag與相應Ab在電解質存在條件下結合，出現肉眼可見的沉澱物。可溶性抗原：血清蛋白、外毒素、組織浸出液、細菌濾液等類型：1）單向瓊脂擴散試驗(singlelagarimmunodiffusion)2）雙向瓊脂擴散試驗(doubleagarimmunodiffusion)1）單向瓊脂擴散試驗應用：Ag鑒定，定量AbAg2）雙向瓊脂擴散試驗(三)免疫標記技術將抗體或抗原反應與螢光素、酶、放射性核素等標記技術相結合，通過檢測標記物，間接測定Ag-Ab複合的一類方法。重要標記技術：1）免疫酶測定(enzymeimmunoassay,EIA)酶聯免疫吸附試驗(ELISA）?

2）免疫螢光技術(immunofluorescencetechnique)3）放射免疫測定法(radioimmunoassay,RIA)4）免疫膠體金技術（immunologicalcolloidalgoldsignature,ICS)1.酶免疫測定用酶標記Ab進行的抗原抗體反應，通過酶作用於底物後顯色來判斷結果。抗原抗體反應＋酶促反應酶聯免疫吸附試驗

（enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA）將已知抗原/Ab吸附在固相載體表面，再用酶標抗體/Ag進行檢測的抗原抗體反應。特點：敏感性高（ng-pg），操作簡便類型：直接法(雙抗體夾心法):Ab+Ag+Ab*間接法:Ag+Ab+抗Ab*雙抗體夾心法2.免疫螢光技術免疫螢光技術:用螢光素標記一抗或二抗，檢測特異性抗原或抗體的方法。分類：

(1)直接螢光法（2)間接螢光法結果觀察:(1)螢光顯微鏡(2)流式細胞儀(Flowcytometer，FCM)3、放射免疫測定法(radioimmunoassay,RIA)用放射性核素標記抗原或抗體進行免疫學檢測的技術第二節免疫細胞功能的檢測免疫細胞的分離、鑒定免疫細胞的功能測定一、免疫細胞的分離外周血單個核細胞（peripheralbloodmononuclearcell,PBMC）T、B細胞的分離與鑒定磁珠分離法螢光啟動細胞分選儀分離法（流式細胞術，FCM)外周血單個核細胞外周血單個核細胞-----淋巴細胞分離液二、免疫細胞及其亞群的分離和分析免疫吸附分離法：Ab包被培養板免疫磁珠法：Ab吸附在磁珠上，加至細胞懸液，細胞吸附磁珠吸附磁鐵，洗脫未結合細胞螢光啟動細