2024_2025学年高中生物第1部分微生物的利用第1课时大肠杆菌的培养和分离学案浙科版选修1.docxVIP

PAGE

PAGE14

第1课时大肠杆菌的培育和分别

[学习目标]1.进行大肠杆菌的扩增，利用液体培育基进行细菌培育的操作。2.进行大肠杆菌的分别，用固体平面培育基进行细菌的划线培育。3.说明大肠杆菌培育的条件和试验原理。

一、微生物培育的基本条件

1.微生物

(1)概念：结构简洁、形体微小的单细胞、多细胞或没有细胞结构的低等生物。

(2)用途：很多种抗生素来源于放线菌和霉菌；酒由酵母发酵产生；腐乳由红曲霉和毛霉发酵制成；微生物能用于治理环境污染，在新能源领域也将发挥巨大作用。

2.培育基

(1)概念：培育基是微生物生存的环境和养分物质。

(2)分类：培育基按物理性质常可分为固体培育基和液体培育基，一般都含有水、碳源、氮源和无机盐四类养分物质，另外还需满意微生物生长对pH、特殊养分物质和氧气的要求。通常细菌培育基要用蛋白胨和酵母提取物来配制，还要加入肯定量的氯化钠以维持肯定的渗透压；霉菌培育基一般用无机物配制或添加蔗糖的豆芽汁即可。

(3)酸碱性：细菌通常要求在中性偏碱的环境中生长，霉菌要求在中性偏酸的环境中生长；因此，在制备培育基时需调整培育基的酸碱度。

特殊提示有关培育微生物所需养分的三点提示

(1)不同微生物对养分的需求不同，所以培育不同的微生物所须要的养分可能不同。

(2)对异养微生物来说，含C、H、O、N的有机物既是碳源又是氮源、能源。

(3)培育微生物时养分物质要协调。养分物质过少不能满意微生物的养分须要，过多对微生物的生长有抑制作用。

3.灭菌操作

(1)常见灭菌方法

①对于培育皿、试管、三角瓶、镊子等常采纳高压蒸汽灭菌法灭菌。

②对于不能加热灭菌的化合物，如尿素等，只能用G6玻璃砂漏斗过滤，但玻璃砂漏斗运用前也要在121℃下用纸包好灭菌。

③试验操作过程中，一般采纳灼烧的方法对接种环进行灭菌。

(2)高压蒸汽灭菌操作的要求

①灭菌前各种用品均需用牛皮纸或报纸包好，在121℃下灭菌15min，试验过程中所需的棉花不能用脱脂棉，因为其易吸水，吸水后简洁引起污染。

②如培育基中有葡萄糖，为防止其分解碳化，要用500_g/cm2压力(90℃以上)灭菌30min。

归纳总结

1.培育基的类型

划分

标准

培育基种类

特点

用途

按物理状态

液体培育基

不加凝固剂

扩大培育或工业生产

半固体培育基

加少量凝固剂而呈半固体状态

视察微生物的运动、分类鉴定

固体培育基

加入凝固剂，如琼脂、明胶、硅胶等

微生物分别、鉴定、活菌计数、保藏菌种

按功能

选择培育基

允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻挡其他微生物生长

培育分别特定的微生物

鉴别培育基

依据微生物的代谢特点，在培育基中加入某种指示剂或化学药品

鉴别不同种类的微生物

按化学成分

自然培育基

含化学成分不明确的自然物质

工业生产

合成培育基

培育基的成分已明确

分类、鉴别

2.无菌操作，既包括各种器皿必需是无菌的，也包括各种培育基必需是无菌的，同时还要求在接种时，不能带有其他杂菌，所以在试验过程中，应时刻保持这种无菌意识。

例1(2024·浙江学军中学月考)下列关于培育基的说法，不正确的是()

A.培育基配制的原则一是目的要明确，二是养分要协调、三是pH要相宜

B.配制培育基时还要考虑微生物对特殊养分物质的要求，否则微生物可能不能生长或生长极差

C.固体培育基中加入少量水即可制成液体培育基

D.选择培育基是允许特定种类微生物生长，但抑制或阻挡其他微生物生长的培育基

答案C

解析培育基配制的原则一是目的要明确，弄清培育基的所属类型，二是养分要协调，符合目的微生物的生长需求，三是pH要相宜，A正确；有的微生物对养分物质具有特殊的要求，配制培育基时还要考虑微生物对特殊养分物质的要求，否则微生物可能不能生长或生长极差，B正确；固体培育基中去除凝固剂(如琼脂、明胶等)即可制成液体培育基，C错误；选择培育基是指在微生物学中，允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻挡其他种类微生物生长的培育基，目的是从众多微生物中分别所须要的微生物，D正确。

例2(2024·温州高二检测)下列关于灭菌的叙述，正确的是()

A.用于细菌等微生物培育的培育基都必需用高压蒸汽灭菌锅灭菌

B.锥形瓶、培育皿、移液管等器具的高压蒸汽灭菌时间一般为15min(121℃条件下)

C.超净工作台或接种箱用紫外灯灭菌30min即可

D.灭菌后的培育基、器具就已经达到了完全无菌

答案B

解析培育基通常可以进行高压蒸汽灭菌，若培育基中有碳酸氢钠、尿素等高温易分解的成分，就不能用此方法，A项错误；超净工作台或接种箱用紫外灯灭菌30min，同时还需打开过滤风，C项错误；灭菌后的培育基、器具不肯定达到了完全无菌，而且要防止二次污染，D项错误。

方法技巧三种常用灭菌方法的比较

灭菌方法

适用材料