血红蛋白病和免疫性溶血性贫血检查.ppt

【DAGT与IAGT临床意义】自身免疫性溶血性贫血药物诱发性免疫性溶血性贫血新生儿溶血病；结缔组织病Rh和ABO血型不合的妊娠DAGT和IAGT阳性见于：DAGT与IAGT阳性见于：第69页，共98页，星期日，2025年，2月5日β链减少α链过剩α链聚集幼红细胞异常大多数幼红细胞在骨髓中死亡（无效性红细胞生成）少数异常红细胞存活食物铁铁吸收增加铁负荷增加继发性血色病低色素性红细胞含包涵体的红细胞在脾破坏骨髓膨胀骨骼变化第37页，共98页，星期日，2025年，2月5日红细胞生成可以增加骨髓的量，并且增加骨髓存储部位的骨髓量，如这里所见的头骨，头骨骨髓的增加可以导致头骨形状变化，“前额隆起”或额头突出。第38页，共98页，星期日，2025年，2月5日患儿颅骨及面颊部骨骼增大，头颅变大，额部隆起，颧高，鼻梁塌陷，两眼距离增宽，眼睑浮肿，形成地中海贫血的特殊面容。第39页，共98页，星期日，2025年，2月5日第40页，共98页，星期日，2025年，2月5日β-地中海贫血临床分类临床类型基因型基因产物临床表现重型?地贫?+/?+、?0/?0??0/??0、?+/?0?链几乎不能合成?链合成相对增加HbF30%和HbA2增高地中海贫血面容溶血性贫血（需输血）轻型?地贫?+/?A、?0/?A??0/?A能合成适量的?链贫血不明显或轻度贫血中间型?地贫?+/??+?链部分合成HbA2↑↑,HbF:N/轻度↑介于重型和轻型之间（不需输血）遗传性胎儿血红蛋白持续增多症缺失或突变?链和?链合成受抑制?链合成明显增加成人HbF持续增加，无症状第41页，共98页，星期日，2025年，2月5日1.血象：小细胞低色素性贫血、RBC大小不一、靶形红细胞多见（重型10%），网织红细胞增加。2.骨髓象:增生明显活跃，粒红比例倒置，呈无效性增生和原位溶血3.基因诊断：southern印记杂交分析和PCR方法检测基因缺失4.血红蛋白电泳：异常血红蛋白电泳条带出现,如HbFHbH等实验室检查第42页，共98页，星期日，2025年，2月5日小细胞低色素性贫血、靶形红细胞多见（重型10%-35%）网织红细胞增加第43页，共98页，星期日，2025年，2月5日三、血红蛋白病的实验室检查抗碱血红蛋白检测血红蛋白电泳血红蛋白F酸洗脱试验异丙醇沉淀试验热变性试验红细胞包涵体试验第44页，共98页，星期日，2025年，2月5日抗碱Hb测定HbF具有比HbA更强的抗碱作用HbF抗碱变性作用强，没有变性存在于上清液中，HbA变性沉淀，取上清液于540nm处测定吸光度，检测出HbF的浓度。此试验也称为碱变性试验，其检测的是抗碱血红蛋白除HbF外，HbBarts和部分HbH也具有抗碱能力，需通过电泳鉴别第45页，共98页，星期日，2025年，2月5日第46页，共98页，星期日，2025年，2月5日原理：根据不同的Hb带有不同的电荷，等电点不同，在一定的PH缓冲液中，缓冲液的PH大于Hb得等电点时其带负电荷，电泳时在电场中向阳极泳动，反之，Hb带正电荷向阴极泳动，经一定电压和时间的电泳，不同的Hb所带电荷不同、分子量不同，其泳动方向和速度不同，可分离出各自的区带，同时对电泳的各区带进行电泳扫描，可进行Hb定量。参考区间：PH8.6TEB缓冲液醋酸纤维膜电泳：正常Hb电泳区带：HbA95%、HbF2%、HbA2为1.0-3.0%.在HbA前出现——快速异常：HbH，J，K组在HbA后出现——慢速异常：HbG，D，E组血红蛋白电泳第47页，共98页，星期日，2025年，2月5日PH8.6TEB缓冲液醋酸纤维膜电泳第48页，共98页，星期日，2025年，2月5日磷酸盐缓冲液(pH6.5)主要用于HbH和HbBarts的检出HbH泳向（+），HbBarts则在点样点不动，而其余的血红蛋白都向（-）TEB缓冲液(pH8.6)适合于检出HbA、HbA2、HbS、HbC，但HbF不易与HbA分开，HbH与HbBarts不能分开和显示箭头所指处为点样点3和6为正常对照标本，1、2、4、5为病人标本第49页，共98页，星期日，2025年，2月5日第50页，共98页，星期日，2025年，2月5日聚丙烯酰胺凝胶电泳第51页，共98页，星期日，2025年，