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血液生理紅細胞比容、血沉及血紅蛋白含量的測定紅細胞、白細胞計數一.紅細胞比容的測定實驗目的：學習測定紅細胞比容的方法將抗凝血放在特製有刻度的玻璃管(溫氏分血管)中，經過離心沉澱，使血細胞與血漿分離。紅細胞下沉，彼此壓緊而又不改變每個血細胞的正常形態。根據玻璃管刻度的讀數，測出紅細胞占全血的容積百分比即紅細胞比容。此時管中的血液分為三層：上層為淡黃色的透明液體即血漿；中層為很薄的一層呈灰白色的白細胞和血小板；下層為擠壓很緊的暗紅色的紅細胞。實驗原理：方法與步驟1.草酸鹽抗凝劑的配製：草酸鉀0.8克，草酸銨1.2克，再加蒸餾水至100毫升。每1毫升血液可用0.1毫升上述溶液。吸取混合草酸鹽抗凝劑溶液，置於小試管內，並使該抗凝劑均勻分佈於小試管內壁上，60－80℃烘箱內烘乾備用。2.采血：將血液緩緩注射於有抗凝劑的試管中，用拇指堵住管口，倒轉試管兩、三次，使血液與抗凝劑混合。3.離心：用長頸滴管吸取試管內的抗凝血，將滴管插入溫氏分管的底部，沿管壁將抗凝血準確加到分血管刻度10釐米處。注意不要有氣泡。將溫氏分血管配平後放入離心機中，3000轉/分鐘離心30分鐘。4.讀數：討論影響比容測定的因素二.血沉的測定目的：學習測定紅細胞沉降率的方法，瞭解測定其數值的意義。原理紅細胞沉降率（血沉）是指血沉管內的抗凝血被靜置一段時間（1h）後，紅細胞因重力而下沉的毫米數。它是以血漿層的高度來計算的，血漿層越高，則血沉越快。家畜有的疾病可以引起紅細胞血沉的顯著加速，故測定紅細胞血沉具有臨床診斷價值。方法與步驟1.采血：5%的檸檬酸鈉作為抗凝劑，抗凝劑與血液之間的容積比例為1：4。2.血沉管（清潔乾燥）：吸血前要混勻抗凝血，加入血沉管的血不能帶有氣泡，血沉管垂直放置於血沉管架上。3.檢查：１５分鐘，３０分鐘，１小時和２小時檢查血沉管上部血漿的高度。討論：影響血沉的因素三.血紅蛋白含量的測定目的：瞭解和掌握比色法測定家兔血紅蛋白的含量原理：在一定量的血液中加入少許鹽酸，酸不僅破壞紅細胞膜，且將紅細胞內的亞鐵血紅素轉變成高鐵血紅素，後者呈較穩定的棕色。將其用蒸餾水稀釋後與血紅蛋白計的標準比色板進行目測比色，即得每100ml血液所含的血紅蛋白的克數。方法與步驟：1.滴加0.1mol/L鹽酸溶液至測定管刻度“2”或“10%”處。2.采血與滴加血液：用吸血管吸血至刻度20立方毫米處；不能有氣泡，反復吹洗幾次。玻棒將血液和鹽酸混勻，放置１０分鐘。3.滴加蒸餾水：逐滴滴加，然後搖勻，觀察顏色，直至比色箱中液體顏色與標準比色板的顏色相同為止。注意事項：血液與鹽酸作用時間：蒸餾水逐滴滴加做三次，取平均值及時清洗吸血管：吸取蒸餾水沖洗幾次，吸取酒精沖洗幾次。實驗要求：記錄血紅蛋白含量並討論該含量的實際意義。四、紅細胞、白細胞記數實驗目的：瞭解紅細胞、白細胞計數的原理，學習人工計數紅、白細胞的方法。實驗原理：一定量的血液稀釋後，置於血細胞計數室內，計算一定體積內的血細胞數，然後再換算成每mm3或１Ｌ血液中的血細胞數。方法與步驟１．血細胞計數板的準備：計數室只能用自來水和蒸餾水沖洗，然後以絲巾輕輕擦幹，切不可用酒精和乙醚洗滌。洗滌完畢後，放入低倍顯微鏡下觀察其構造。血球記數板構造：兩個計數室，每室分為9個大格。格與蓋玻片的距離為0.1mm，每大格邊長為1mm，面積為1mm2，體積為0.1mm3。四角的4個大方格分為16個中方格，用作白細胞計數。

中央大方格被分為25個中方格，每個中方格邊長為0.2mm，面積為0.04mm2，體積為0.004mm3。每個中方格又分為16個小方格，中央大方格四角的中方格和中央的中方格用作紅細胞計數。