《分子生物学》-6.2续：原核生物的转录与调控（中大生科院）.docxVIP

6.2原核生物的转录与调控

2.原核生物转录的调控

?转录后调控

1.mRNA自身结构元件

起始密码子

大肠杆菌的起始密码子

AUG(83%ofgenes),GUG(14%)andUUG(3%)

5’-UTR

RBS的结合强度取决于SD序列的结构及其与起始密码AUG之间的距离

SD与AUG之间相距一般以4-10个核苷酸为佳，9个核苷酸最佳

SD序列的微小变化改变形成mRNA5’端二级结构的自由能，影响核糖体30S亚基与mRNA的结合

核糖开关

一段具有复杂结构的RNA序列

在原核生物中通常位于mRNA的5’UTR区域

感受细胞内注入代谢物浓度、离子浓度、温度等的变化而改变自身的二级结构和调控功能

SAM-I核糖开关对SAM的响应

mRNA稳定性

mRNA的结构影响其稳定性

5’端三磷酸化，保护其免受某些核酸酶的攻击

转录翻译偶联，不被翻译的mRNA很快被降解

mRNA稳定性:CsrAB调节系统

参与多种生命活动和次级代谢物的合成

在大肠杆菌、假单胞菌等微生物中广泛存在

反义RNA的调节作用

反义RNA：碱基序列与mRNA互补的RNA

RNA干扰技术RNAi

双链RNA（double-strandedRNA，dsRNA）诱发的mRNA高效特异性降解

3.原核生物转录的主要转换模式

一组同时控制的操纵子operon被称为调控子Regulon

两个类别：

Modulon：响应所有类型的压力和条件

刺激子：仅响应环境变化或刺激

?σ因子的转换

σfactor

asubunitofRNAP

同一个核心酶，不同的σ因子

负责模板链的选择和转录的起始

转录起始完成后从RNAP上释放

σcycle:σ因子能够循环利用

不同的σ因子，不同的识别序列

不同的σ因子，不同的表达场景

热激Heatshock（分子伴侣）

噬菌体SPO1感染枯草芽孢杆菌

成功的前提：

噬菌体早期基因启动子的共有序列与枯草芽孢杆菌σ因子的识别序列有相似性

噬菌体SPO1的σ因子（gp34gp28）与枯草芽孢杆菌的σ因子相似

枯草芽孢杆菌的产孢过程

革兰氏阳性菌，土壤、植被

营养充足时，B.subtilis每20min分裂一次

营养缺乏或其它环境变化时，B.subtilis会形成芽孢（7hat37°C）

ANTI-σregulation

结合并抑制其同源σ因子的反σ因子

RNA聚合酶数量是有限的

核心RNA聚合酶没有选择σ因子的权利

不同的σ因子对核心RNA聚合酶有不同的亲和力

σ因子的浓度受到严格的调控

σ70andRsd

?特异性RNA聚合酶

?抗终止子机制

思考

1.原核生物中一个基本的转录单元的DNA序列组成

2.原核生物中转录的基本步骤以及各个步骤的参与者

3.影响转录效率的因素

4.复制和转录的比较

5.

大肠杆菌色氨酸操纵子中如果出现了下列突变，请分析一下突变菌株对色氨酸浓度的响应将如何变化。

1．前导序列中连续的色氨酸密码子数增加

2．在前导序列的两个连续的色氨酸密码子中间插入两个其他氨基酸的密码子

3．将前导序列中两个色氨酸密码子突变为终止密码子